EFEK MADU ( Apis dorsata) TERHADAP KULTUR FIBROBLAS TIKUS (Rattus norvegicus) DIABETES YANG DIINDUKSI STREPTOZOTOCIN DAN NIKOTINAMIDA

JANUAR RIZQI, Dr. dr. Denny Agustiningsih., M.Kes, AIFM.; r. Dwi Aris Agung N, M.Sc., Ph.D.

2016 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Dasar dan Biomedis

Latar belakang: Penyembuhan luka pada diabetes (DM) lebih lambat dibandingkan dengan lukanormal karena terjadi disfungsi fibroblas. Luka DM menyebabkan gangguanproliferasi serta migrasi sel yang diakibatkan oleh penurunan vascular endhotelialgrowth factor (VEGF-A) dan connective tissue growth factor (CTGF). Madusebagai alternatif topikal penyembuhan karena ekonomis dan mudah didapatkanMadu memiliki aktifitas antibakteri, antioksidan yang berguna untukmeningkatkan proliferasi maupun migrasi sel. Tujuan: penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian madu terhadap kulturfibroblas tikus DM dalam media tinggi glukosa, khususnya mengkaji jumlahfibroblas, aktivitas migrasi, ekspresi gen VEGF-A dan CTGF. Metode: Jenis Penelitian ini adalah eksperimantal murni menggunakan desain post testonly with control group design dengan sampel kultur primer fibroblas tikus galur Wistar DM yang dibagi menjadi 6 kelompok. Uji proliferasi dilakukan denganmenghitung jumlah sel menggunakan bilik hitung hemositometer pewarnaan Tripan Blue. Aktivitas migrasi dilakukan dengan uji scratch assay, dan pemeriksaan ekspresi gen VEGF-A, CTGF dengan metode RT-PCR dianalisamenggunakan softwere ImageJ. Hasil: Madu konsentrasi 1,5% dan 0,75% dapat meningkatkan proliferasi fibroblas dalam media tinggi glukosa (p<0,05). Tidak terdapat perbedaan bermaknaaktivitas migrasi sel dalam media tinggi glukosa setelah diberikan madu (p>0,05)Madu konsentrasi 1,5% memiliki ekspresi VEGF A dan konsentrasi 1,5%, 0,75%memiliki ekspresi CTGF lebih tinggi dibandingkan kelompok kontrol mediatinggi glukosa (p<0,05). Pemberian madu pada sel fibroblas menunjukanperbedaan yang tidak bermakna antar kelompok (p>0,05). Efek madu dalam meningkatkan migrasi dan proliferasi sel belum sebanding dengan kelompok fibroblas normal (p<0,05). Kesimpulan: Madu dapat meningkatkan ekspresi gen VEGF-A dan gen CTGF sel fibroblasyang diikuti dengan peningkatan proliferasi sel fibroblas dalam media tinggglukosa.

Background: Wound healing in diabetic (DM) is slower than the normal wound as fibroblast cell dysfunction. diabetic wounds cause cell proliferation and migration caused by the decline in endothelial vascular growth factor (VEGF-A) and connective tissue growth factor (CTGF). Honey as a topical alternative medication as economical and readily available. Honey has an antibacterial activity, an antioxidant that can increase cell proliferation and migration. Aim: This study aims to determine the effect of honey on the culture rat DM of fibroblasts in high-glucose media, in particular assessing the number of fibroblasts, migration activity, gene expression of VEGF-A and CTGF. Method: This study used primary cultures rat DM of skin fibroblast were then divided into groups in the media high glucose (HG), honey treatment (MD) and low glucose control (LG). Proliferation assay was evaluated using trypan Blue staining by counting the number of fibroblasts. Migration activity was measured by scratch test assay. Gene expression of VEGF-A, CTGF were measured by RT-PCR method and analyzed using ImageJ software. Results: The honey concentration of 1.5% and 0.75% can enhance the proliferation of fibroblasts in a medium of high glucose (p<0.05). There were no significant differences in cell migration activity in high-glucose media after being given the honey (p>0.05). The honey concentration of 1.5% can increase the expression of VEGF-A and a concentration of 1.5%, 0.75% can increase the expression of CTGF. Honey treatment with various concentrations showed no significant difference between groups (p>0.05). Conclusion: Honey increases gene expression of VEGF-A and the CTGF gene fibroblast cell cultures followed by increasing cell proliferation of fibroblasts in a high-glucose media.

Kata Kunci : Diabetic foot ulcer, madu, proliferasi sel, migrasi, ekspresi gen VEGF-A, ekspresi gen CTGF, media tinggi glukosa, Diabetic foot ulcers, honey, cell proliferation, migration, gene expression of VEGF-A, CTGF gene expression, high glucose media