Korelasi antara Ekspresi Receptor Endothelin-1 Tipe A dengan Cedera Tubulus pada Mencit dengan 5/6 Nefrektomi Subtotal

ESTELITA LIANA, dr. Nur Arfian, Ph. D.; dr. Muhammad Mansyur Romi, SU, PA(K).

2015 | Skripsi | PENDIDIKAN DOKTER

LATAR BELAKANG: Gagal ginjal kronis (GGK) merupakan penyakit dengan insidensi yang terus meningkat, di Indonesia penyebab gagal ginjal terbesar adalah hipertensi. Keadaan gagal ginjal diketahui menyebabkan adanya vasokonstriksi pembuluh darah aferrent yang kemudian menyebabkan perburukan ginjal. Endothelin-1 diketahui memiliki peran dalam meregulasi pembuluh darah di ginjal. Ikatan antara Endothelin-1 dengan reseptor Endothelin A(ETAR) menyebabkan vasokonstriksi. Pengetahuan mendalam mengenai Endothelin diyakini dapat menjadi alternatif terapi yang dapat dikembangkan kedepannya. TUJUAN: Mengetahui korelasi antara ekspresi reseptor Endothelin A dengan tingkat cedera tubulus pada mencit model gagal ginjal kronis dengan 5/6 nefrektomi subtotal METODE: Dilakukan 5/6 nefrektomi subtotal (SN) pada mencit galur Swiss untuk menginduksi GGK. Sham Operation (SO, n=5) tidak dilakukan 5/6 SN sebagai kontrol. Mencit diterminasi pada hari ke-7 (1N, n=4) dan hari ke-28 (4N, n=4) setelah operasi. Dilakukan pengukuran serum kreatinin untuk mengetahui fungsi ginjal. Skor cedera tubulus dihitung pada sediaan parafin dengan pewarnaan Periodic Acid Schiff (PAS). Pemeriksaan ekspresi prepro-ET-1 dan eNOS dilakukan dengan ekstraksi RNA, pembuatan cDNA, dan Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR). HASIL: Didapatkan peningkatan kreatinin serum dan cedera tubulus secara signifikan dari SO, 1N, dan 4N (P<0,05). Analisis densitometri dari RT-PCR menunjukkan peningkatan ekspresi ETAR pada 1N dan 4N (p>0,05 vs SO) yang berarti terdapat peningkatan jumlah tidak signifikan. Pada korelasi antara ekspresi ETAR dengan cedera tubulus (r: 0.200; p>0,05) dihasilkan korelasi positif yang tidak signifikan. KESIMPULAN: Peningkatan cedera tubulus pada GGK paralel dengan peningkatan ekspresi ETAR pada ginjal. Nilai peningkatan ekspresi ETAR tidak signifikan dengan menggunakan PCR.

BACKGROUND: Chronic Kidney Injury is increasing incidention disease, in Indonesia the leading cause of kidney injury is hypertension. The incidence of kidney injury is known as thecause of afferent vasoconstriction that makes a worsening of kidney. Bounding of Endothelin-1 with Endothelin A receptor (ETAR) cause vasoconstriction. In-depth knowledge of the Endothelin is believed to be an alternative therapy that can be developed in the future. GOAL: Knowing the correlation between Endothelin A receptor expression with tubular injury in mice model of chronic renal failure with 5/6 subtotal nephrectomy. METHOD: We performed 5/6 Subtotal Nephrectomy (SN) in male Swiss Background mice to induce CKD. Sham operation (SO, n=5) procedure without nephrectomy was performed on mice as control. The mice were sacrificed in day 7 (1N, n=5) and day 28 (4N, n=4) after operation. We measured creatinine serum to assess renal function. Tubular injury score was quantified based on Periodic Acid Schiff (PAS) staining from paraffin slide. We performed RNA extraction, cDNA making and Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR) to examine the expression of prepro-ET-1 and eNOS. RESULT: Significant increase of serum creatinine and tubular injury from SO, 1N, and 4N were observed (p<0.05). Densitometry analysis of RT-PCR revealed up regulation of ETAR expression in 1N and 4N (p>0.05 vs SO) there is insignificant increasing level. Between ET-1 and tubular injury expression (r: 0.200;p>0,05) there is insignificant parallel correlation. CONCLUSION: Increasing tubular injury in CKD parallel with the increasing expression of ETAR in kidney. The increasing levels is not significant with PCR test.

Kata Kunci : gagal ginjal kronis, endothelin-1, ETAR, nefrektomi subtotal, cedera tubulus