AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN INDUKSI APOPTOSIS EKSTRAK DAN FRAKSI ETANOLIK BEKATUL BERAS HITAM WOJALAKA TERHADAP SEL KANKER KOLON (WiDr)

DWIMEI AYUDEWANDARI PRANATAMI, Dra. Rarastoeti Pratiwi, M.Sc., Ph.D. ; Woro Anindito Sri Tunjung, S.Si., M.Sc., Ph.D.

2016 | Tesis | S2 Biologi

Kanker kolon menjadi salah satu kanker yang memiliki peningkatan jumlah kasus di beberapa tahun terakhir. Salah satu kandidat yang dapat digunakan untuk bahan pangan preventif kanker adalah beras hitam yang mengandung banyak senyawa bioaktif pada bagian aleuronya terutama antosianin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas sitotoksik ekstrak dan fraksi etanolik bekatul beras hitam Wojalaka, mengidentifikasi golongan senyawa yang bersifat sitotoksik, mengetahui penghambatan proliferasi, mengetahui proses kematian dan profil siklus sel kanker kolon WiDr. Bekatul beras hitam diekstraksi menggunakan etanol secara maserasi. Ekstrak dimonitor kandungan senyawanya dengan kromatografi lapis tipis (KLT) dan diuji sitotoksisitasanya dengan sel WiDr menggunakan metode MTT Assay. Ekstrak difraksinasi menggunakan metode kromatografi lapis tipis preparatif (KLTP). Fraksi kemudian diuji sitotoksisitas terhadap kultur sel WiDr dan sel Vero menggunakan MTT Assay. Selanjutnya dilakukan identifikasi golongan senyawa, uji penghambatan pertumbuhan, pengamatan kematian dan profil siklus sel WiDr menggunakan metode flowcytometry. Nilai IC50 ditentukan dengan analisis probit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanolik bekatul beras hitam Wojalaka bersifat toksik terhadap sel WiDr dengan nilai IC50 sebesar 620,66± 61,57µg/ml. Fraksi 6 (F6) merupakan fraksi paling toksik dengan IC50 sebesar 44,01± 0,86µg/ml dan mampu menghambat proliferasi pada sel kanker WiDr dibanding kontrol. Golongan senyawa yang terdeteksi dalam F6 adalah fenolik, flavonoid, terpenoid dan steroid serta diduga mengandung kuersetin, selain itu F6 juga terbukti mampu menginduksi apoptosis pada sel WiDr lebih besar dibanding doxorubicin dan menghambat siklus sel WiDr pada fase G2/M.

The number of colon cancer case increased significantly in the recent years. Decreasing cancer risk could do with prevention. One of the candidates that can be used for cancer preventive food is black rice that contains several bioactive coumpounds especially antosianin. The purpposes of the riset were to determine the cytotoxic activity of ethanolic extract and fractions of black rice bran Wojalaka that has limited information, to identify the groups of coumpounds which have cytotoxic activity, to know inhibition of proliferation, and also to find out the death process cell and cell cycle profiles of colon cancer WiDr. The research was began with the extraction of rice bran Wojalaka by maceration using ethanol followed by Thin Layer Chromatography (TLC) to monitor the coumpound content. After that, fractionation processed by Preparative Thin Layer Chromatography (PTLC). The each fraction was used for cell culture cytotoxicity assay WiDr and Vero cells using MTT Assay. The most toxic fraction was used to identify the bioactive class coumpound, seen the antiprolifetive effect and observed cell death and cell cycle profile WiDr Using Flowcytometri. IC50 values were quantified using probit analysis. Results showed that the ethanolic extract had cytotoxic activity with IC50 620.66± 61.57 µg/ml. From 6 fraction, F6 was the most toxic fraction with IC50 44.01± 0.86 µg/ml. The coumpund groups which have cytotoxic activity wetr phenolic, flavonoid, terpenoid, steroid and was estimate had kuersetin, F6 was able to inhibited proliferation cell, induce apoptosis further and caused G2/M-phase arrest on WiDr cell line.

Kata Kunci : : bekatul beras hitam Wojalaka, sel WiDr, sitotoksisitas, antiproliferatif apoptosis, siklus sel.