KARAKTERISASI PROFIL PROTEIN DAN IDENTIFIKASI PROTEIN IMMUNOGENIK ISOLAT Trypanosoma evansi ASAL PULAU JAWA

WISNU JAKA DEWA, Dr. drh. R. Wisnu Nurcahyo; Dr. April H. Wardhana SKH., M.Si

2015 | Tesis | S2 Sain Veteriner

Penyakit Surra merupakan penyakit pada ternak yang disebabkan oleh protozoa Trypanosoma evansi. Kerugian yang diakibatkan oleh T. evansi diperkirakan mencapai US$ 22.4 juta per tahun (Ronoharjo et al., 1986). Diagnosa penyakit Surra masih menjadi permasalahan saat ini, dimana sebagian besar masih tergantung dari identifikasi parasite secara langsung . Tujuan dari penelitian ini adalah untuk melihat karakter profil protein T. evansi dan mengidentifikasi protein immunogenik spesifik menggunakan sera hiperimun kelinci. Lima isolat T. evansi yang berasal dari daerah yang berbeda di pulau Jawa digunakan dalam penelitian ini. Isolasi protein isolat T. evansi dilakukan menurut metode Lanham dan Gofrey (1970). Setelah mendapatkan protein dalam bentuk Whole Cell Lysate (WCL), dilakukan fraksinasi protein menggunakan metode sodium dodecyl sulphate polyacrilamide gel electrophoresis (SDS PAGE) untuk melihat karakter profil protein T. evansi. Penelitian dilanjutkan untuk mengidentifikasi adanya protein immunogenik yang spesifik dari isolat-isolat yang digunakan melalui metode Western Blot (Immunoblotting) dengan sera hiper immun dari kelinci yang diinfeksi dua isolat T. evansi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolat T. evansi yng berasal dari daerah geografis yang berbeda di Pulau Jawa memiliki pola profil protein yang beragam dan di antara isolat-isolat yang digunakan dalam penelitian ini tidak ditemui adanya protein yang bersifat immunogenik dan spesifik.

Surra is a livestock disease caused by haemoprotozoan parasite Trypanosoma evansi. The economic loss caused by T. evansi was estimated US$ 22,4 million per year (Ronoharjo et al., 1986). Surra diagnosis remain problematic recently, whereas depends on direct identification. The aim of this research is to characterize T. evansi protein profile and identify spesific immunogenic protein using hyperimmune sera. Five Trypanosoma evansi isolates from different geographic area used for this research. Method used for T. evansi protein isolation based on standard isolation method by Lanham and Gofrey (1970). After Whole cell lysate (WCL) protein collected, protein resolved by sodium dodecy sulphate polyacrilamide gel electrophoresis (SDS PAGE) to observe T. evansi protein profile. Research then continued to identified spesific and common immunogenic protein of T. evansi with Western blot (Immunoblotting) using hyper immune sera from rabbit experimentally infected by two T. evansi isolates. The result shows that T. evansi isolates from different geographic area in Java Island has varied protein profile and neither immunogenic nor spesific proteins could be found from five isolates used in this research.

Kata Kunci : Trypanosoma evansi, protein isolation, immunogenic protein, SDS PAGE, Immunoblotting