ISOLASI DAN PENGUJIAN AKTIVITAS EKSTRAK KASAR SELULASE DARI Paenibacillus spp

ENDANG PAMULATSIH, M. Saifur Rohman, S.P., M.Si., M.Eng., Ph.D.; Prof.Ir. Triwibowo Yuwono, Ph.D.

2016 | Skripsi | S1 MIKROBIOLOGI PERTANIAN

Selulase merupakan enzim hidrolase yang secara spesifik memotong ikatan β-1,4-glikosidik pada selulosa. Penelitian ini bertujuan untuk mengukur aktivitas selulase dari Paenibacillus cellulositrophicus SBT1 dan Paenibacillus sp. SBT8 yang sebelumnya telah diisolasi dari usus rayap. Aktivitas enzimatik diukur menggunakan metode dinitrosalicylic acid (DNS) dan CMC digunakan sebagai substrat untuk pengujian. Pada penelitian ini juga dilakukan pengujian pengaruh temperatur, pH, dan ion logam terhadap aktivitas enzimatik selulase kedua isolat. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kedua isolat mampu mensekresikan selulase ekstraselular ke dalam medium minimal yang mengandung 1% CMC. Total protein yang dihasilkan oleh Paenibacillus cellulositrophicus SBT1 dan Paenibacillus sp. SBT8, secara berturut-turut yakni 18,6 and 24,8 mg/L. Pengujian aktivitas enzimatik menunjukkan bahwa aktivitas selulase Paenibacillus cellulositrophicus SBT1 lebih tinggi bila dibandingkan dengan aktivitas selulase Paenibacillus sp. SBT8. Pada penelitian ini, kedua selulase menunjukkan rentang temperatur yang luas untuk aktivitas enzimatiknya. Pengaruh pH terhadap aktivitas selulase menunjukkan bahwa kedua selulase aktif pada pH asam. Penambahan ion logam sebagai kofaktor tidak berpengaruh terhadap aktivitas enzimatik kedua selulase.

Cellulase is a hydrolytic enzyme that specifically cleaves β---1,4-glycosidic bonds of cellulose. The objective of this work was to measure the cellulase activity from Paenibacillus cellulositrophicus SBT1 and Paenibacillus sp. SBT8 that was previously isolated from termite's gut. Enzymatic activity was measured by dinitrosalicylic acid (DNS) method using CMC as the substrate for assay. The effect of temperature, pH, and metal ions on enzymatic activity were also examined. The results showed that both Paenibacillus produce extracellular cellulose in minimal medium supplemented with 1% of CMC. The total protein produced by Paenibacillus cellulositrophicus SBT1 and Paenibacillus sp. SBT8 were 18,6 and 24,8 mg/L, respectively. Enzymatic acitivity assay indicated that cellulase activity from Paenibacillus cellulositrophicus SBT1 was higher than that of Paenibacillus sp. SBT8. It is observed that, under the condition used in this work, both celluases showed the broad range of temperature for enzymatic activity. The effect of pH on the cellulase activity indicated that both cellulases were active at acidic pH. The addition of metal ion as a cofactor apparently did not affect the enzymatic activity of both cellulases.

Kata Kunci : selulase, Paenibacillus cellulositrophicus SBT1, Paenibacillus sp. SBT8, CMC, ion metal