Isolasi dan Optimasi Pertumbuhan Bakteri Proteolitik dari Terasi Udang

PERDANA PUJA KESUMA, Prof. Dr. Ir. Ustadi, M.P.

2016 | Skripsi | S1 TEKNOLOGI HASIL PERIKANAN

Penelitian ini bertujuan mengisolasi bakteri proteolitik dari terasi udang, mengetahui aktivitas protease dan pertumbuhan isolat terpilih, suhu dan pH optimum, serta identifikasi. Isolasi dan skrining bakteri dilakukan dengan mengevaluasi indeks proteolitik pada medium skim milk agar. Aktivitas protease diukur dengan prinsip kolorimetri menggunakan substrat azocasein, sedangkan pertumbuhan bakteri dilakukan dalam medium cair dengan mengukur kerapatan sel pada λ 600 nm. Optimasi pH pertumbuhan isolat terbaik dilakukan pada 5 titik yaitu 4, 5, 6, 7, dan 8, optimasi suhu pertumbuhan isolat terbaik dilakukan pada 3 titik yaitu 30, 37, dan 44oC. Identifikasi isolat dilakukan menggunakan uji biokimia berdasarkan Bergey’s Manual Determinative Bacteriological. (Holt et al., 1994). Sebanyak 31 bakteri proteolitik berhasil diisolasi dari terasi udang dengan dengan 5 isolat yang memiliki indeks proteolitik tertinggi yaitu SDJ 4.5, SDJ 3.4, SDJ 4.4, SDJ 4.3, dan SDJ 4.2 sebesar 3,16 ; 2,60; 2,47; 2,45; 2,45. Isolat SDJ 3.4 menunjukkan aktivitas protease tertinggi mencapai 3,61 ± 1,53 U/ml pada waktu inkubasi 12 jam. Kondisi optimum isolat terpilih (SDJ 3.4) adalah pada pH 7 pada waktu inkubasi 18 jam dan suhu 37oC pada waktu inkubasi 12 jam. Hasil uji biokimia dan identifikasi menurut Bergey’s Manual Determinative Bacteriological (Holt et al., 1994), isolat SDJ 3.4 tergolong dalam genus Bacillus.

This study aims to isolate proteolytic bacteria from shrimp paste, knowing protease activity and growth of selected bacteria, optimum temperature and pH, and identification. Isolation and screening of bacteria carried by evaluating proteolytic index using skim milk agar. Protease activity was measured by using a colorimetric principles azocasein substrate, while the growth of bacteria carried in a liquid medium by measuring cell density at λ 600 nm. Optimization of growth best pH isolates conducted at 5 points, namely 4, 5, 6, 7, and 8, isolate the growth temperature optimization done on 3 points, namely 30, 37 and 44oC. Identification of the isolates was performed using biochemical tests based on Bergey’s Manual Determinative Bacteriological (Holt et al., 1994). There are 31 proteolytic bacteria were isolated from shrimp paste. Five isolates elected screening is SDJ 4.5, SDJ 3.4, 4.4 SDJ, SDJ 4.3 and SDJ 4.2 amounted to 3.16; 2.60; 2.47; 2.45; 2.45. SDJ 3.4 shows highest protease activity reached 3.61 ± 1,53 U / ml at 12 hours incubation time. The optimum conditions selected isolates (SDJ 3.4) is at pH 7 at 18 hours incubation time and 37°C respectively at the 12-hour incubation time. Biochemical test results and identification according to Bergey’s Manual Determinative Bacteriological (Holt et al., 1994), isolates SDJ 3.4 belonging to the genus Bacillus.

Kata Kunci : bakteri proteolitik, terasi udang, aktivitas protease, pertumbuhan bakteri, identifikasi