ISOLASI DAN KARAKTERISASI STRUKTUR KIMIA SENYAWA IMUNOMODULATOR DARI BINTANG LAUT (ACANTHASTER PLANCI)

M. JANIB ACHMAD, Prof. Ustadi; Prof Kamiso; Dr. Alim Isnansetyo; Noer Kasanah, Ph.d

2015 | Disertasi |

Tujuan penelitian ini adalah: (1) mengetahui aktivitas senyawa kimia yang diisolasi dari A. planci sebagai imunomodulator; (2) melakukan elusidasi salah satu senyawa kimia yang bertanggung jawab dalam meningkatkan mekanisme kerja sistem imun; (3) mengetahui aktivitas dan efektivitas fraksi terpilih pada sistem kekebalan non-spesifik Clarias sp. Dasar pengujian adalah mengisolasi A. planci yang diperoleh dari pulau Ternate, Maluku Utara, dengan metode purifikasi yang digunakan adalah activity guided isolation. Tahapan penelitian ini terdiri atas ekstraksi dan partisi, purifikasi, elusidasi dan identifikasi senyawa kimia. Aktifitas imunomodulator dihitung berdasarkan perhitungan persentase dari kapasitas fagositosis (KF) dan indeks fagositosis (IF), aktivitas proliferasi limfosit dihitung berdasarkan optical density (OD). Sedangkan elusidasi struktur dilakukan dengan menggunakan metode pengukuran spektroskopi liquid cromatography spectrometer massa (LC-MS), IR (FTIR), UV-VIS dan 1H-13C-NMR. Hasil uji aktivitas menunjukkan pada ekstrak metanol dan air, nilai efektifitas KF tertinggi pada ekstrak metanol dan IF tertinggi pada ekstrak air, sedangkan nilai OD pada uji proliferasi limfosit tertinggi pada ekstrak metanol. Hasil uji 3 fraksi (Fraksi klorofom; fraksi heksan; fraksi air), menunjukkan nilai KF tertinggi pada fraksi heksan dan IF tertinggi pada fraksi klorofom, sedangkan sedangkan nilai OD pada uji proliferasi tertinggi pada fraksi air. Hasil uji aktivitas 3 fraksi (Fr Kl3.1; Fr Kl3.2; Fr Kl3.3) dari fraksinasi fraksi Fr Kl3 menunjukkan nilai KF dan IF tertinggi pada fraksi Fr Kl3.1. Pada hasil uji aktivitas 5 fraksi (Fr Kl3.1.1; Fr Kl3.1.2; Fr Kl3.1.3; Fr Kl3.4; Fr Kl3.1.5) hasil KLT preparatif dari fraksi Fr Kl3.1, menunjukkan nilai KF dan IF tertinggi pada fraksi Fr Kl3.1.3. Hasil uji aktivitas 3 fraksi (Fr Kl3.1.3.1; Fr Kl3.1.3 .2; Fr Kl3.1.3.3) hasil fraksinasi dari Fr Kl3.1.3 menunjukkan nilai KF dan IF tertinggi pada fraksi Fr Kl3.1.3.1. Dari beberapa tahap purifikasi akhirnya diperoleh fraksi Fr Kl3.1.3 sebagai fraksi terpilih yang selanjutnya disebut sebagai senyawa F1, hasil elusidasi struktur kimia dari senyawa F1 menunjukkan bahwa senyawa kimia yang bertanggung jawab pada peningkatan mekanisme sistem imun adalah ergos-7-en-3-ol. Pada hasil uji hematologi pada Clarias sp dari fraksi Fr Kl3 menunjukkan bahwa ada peningkatan efektifitas sistem kekebalan non-spesifik pada Clarias sp.

The aims of this study were (1) to investigate the activity of chemical compound isolated from A. planci as an immunomodulator; (2) to charaterize a chemical compound that responsible for increasing the immune system mechanism; and (3) to investigate the activity and effectiveness of a chosen fraction on the non-specific immune system of Clarias sp. The main method isolate compound from A. planci collected from Ternate Island, North Moluccas was activity guided isolation. Steps of this research were extraction and partition, purification, elucidation and identification of a chemical compound. Immunomodulator activity and effectiveness were measured based on percentage of phagocytic capacity (PC) and phagocytic index (PI), and the lymphocyte proliferation activity was measured based on percentage index stimulation (IS) from sample absorbancy and control absorbancy. Besides, elucidation structure was done using spectroscopy measurement method of liquid chromatography spectrometer mass (LC-MS), IR (FTIR), UV-VIS and 1H-13C-NMR. The activity test result exhibited that, the highest value of PC was on methanol extract and PI was on extract water. Meanwhile, the highest value of OD on lymphocytes proliferation test was on methanol extract. The test result of 3 fractions showed that the highest value of PC was on hexane fraction and PI was on chloroform fraction. The highest OD value of lymphocytes proliferation was found in water fraction. The activity test of 3 fractions (Fr Kl3.1; Fr Kl3.2; Fr Kl3.3) showed, the highest value of PC and PI was on Fr Kl3.1 fraction. The activity test result of 5 fractions (Fr Kl3.1.1; Fr Kl3.1.2; Fr Kl3.1.3; Fr Kl3.4; Fr Kl3.1.5) by preparative TLC from Fr Kl3.1 fraction showed that the highest value of PC and PI was found in Fr Kl3.1.3 fraction. The activity test result of 2 fractions (Fr Kl3.1.3.1; Fr Kl3.1.3 .2) of fractination Kl3.1.3 fraction showed that the highest value of PC and PI was found in Fr Kl3.1.3.1 fraction. Based on several purifiction stages, Fr Kl3.1.3 fraction was selected as compound F1. The results of a chemical structure elucidation of compound F1 showed that chemical compound responsible for improving the mechanisms of the immune system was named ergos-7-en-3-ol. Finally, hematology exhibited increasement the effectiveness on non-spesifik immune system of Clarias sp from Fr Kl3 fraction.

Kata Kunci : Acanthaster planci, Immunomodulator, Phagocytic Capacity, Phagocytic Index, ergost-7-en-3-ol, Clarias sp.