IDENTIFIKASI GOLONGAN SENYAWA ANTIOKSIDAN DAN SITOTOKSISITAS DAUN GAHARU (Gyrinops versteegii (Gilg.) Domke) TERHADAP SEL KANKER LEHER RAHIM (HeLa)

RINI ISROMARINA, Prof. Sukarti Moeljopawiro, Ph.D. ; Tri Rini Nuringtyas, Ph.D.

2015 | Tesis | S2 Biologi

Bahan alam sebagai obat herbal untuk pengobatan penyakit yang disebabkan oleh radikal bebas dan penyakit kanker semakin banyak digunakan saat ini. Salah satu tanaman yang digunakan untuk pengembangan obat herbal adalah tanaman gaharu. Pemanfaatan daun gaharu belum banyak dikenal masyarakat dan penelitian terkait senyawa yang terkandung dalam daun gaharu belum intensif diteliti di Indonesia. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi golongan senyawa bioaktif dan umur daun yang memiliki aktivitas antioksidan serta mengetahui ekstrak yang mempunyai efek sitotoksik terhadap sel kanker leher rahim (HeLa). Daun Gyrinops versteegii tua dan muda yang diperoleh dari kebun raya Bogor dikeringkan dan diekstraksi secara berjenjang dengan kloroform, metanol, dan air dengan metode soxhletasi. Uji aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH dan uji sitotoksik terhadap sel kanker dengan metode MTT assay. Ekstrak potensial antioksidan difraksinasi dengan metode VLC dan identifikasi golongan senyawa dengan KLT diikuti deteksi dengan peraksi semprot. Nilai IC50 ekstrak ditentukan dengan analisis probit dan persamaan regresi linear. Ada dan tidaknya beda nyata antar perlakuan pada data terdistribusi normal dianalisis dengan ANOVA dan untuk mengetahui letak perbedaan dilanjutkan dengan DMRT, sedangkan data terdistribusi tidak normal dianalisis dengan kruskal wallis dan uji lanjut games howel. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak metanol daun gaharu tua dan fraksi gabungan II (metanol : etil asetat = 1 : 1 dan metanol : etil asetat = 5 : 1) memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi dengan masing-masing IC50 11,659 mikrogram/ml dan 12, 958 mikrogram/ml. Golongan senyawa bioaktif sebagai antioksidan adalah fenol, flavonoid, dan tanin. Kandungan total fenol pada daun tua lebih sedikit dari pada daun muda. Sebaliknya, total flavonoid daun tua lebih banyak dari pada daun muda.Untuk uji sitotoksik, ekstrak kloroform daun muda memiliki aktivitas sitotoksik paling tinggi dengan IC50 11,37 mikrogram/ml. Aktivitas antioksidan dan sitotoksik terhadap sel HeLa daun gaharu dipengaruhi oleh umur daun. Ekstrak metanol daun gaharu tua mempunyai aktivitas antioksidan paling tinggi dan ekstrak kloroform daun gaharu muda mempunyai efek sitotoksik paling tinggi terhadap sel HeLa.

A number of tradition came to dominate the practice of herbal medicine in the Western world at the end of the twentieth century. In developed countries, the practice of herbal medicine could be connected with the trend favourable to the socalled a sustainable development and to reducing public health cost. Recently, several part of agarwood have been extensively used to treat diarrhoea, dysentery, antiinflamation and skin diseases. The scientific studies of antioxidant and anticancer activity of agarwood leaf Gyrinops versteegi relatively very few. The objective of this study was to identify bioactive group of compound and to know the difference of antioxidant activity between young and old leave and also to analyze the extracts which have cytotoxic effects on cervical cancer cells (HeLa). The young and old Gyrinops versteegii leaves collected from Bogor botanical garden was dried and extracted consecutively using three solvents chloroform, methanol, and water by soxhletation method. The test of antioxidant activity was conducted using DPPH and cytotoxic test using MTT assay method. The antioxidant potential extract was fractionated by VLC method and the identification group of compounds using TLC followed by the detection by detector reagent. The value of IC50 extract was determined by probit analysis. ANOVA was used to analyze the difference among samples followed by DMRT to locate the difference, whereas kruskal wallis to distribution of abnormal data and followed by games howel. The result showed that the methanol extract of old agarwood leaf and the combined fraction II (methanol: ethyl acetate = 1: 1 and methanol: ethyl acetate = 5: 1) has the high antioxidant activity with IC50 value of 11,659 microgram/ml and12,958 microgram/ml respectively. The bioactive group of compound which was efficacious as antioxidant were phenols, flavonoids, and tannin. The total content of phenols in leaves was lower in elderly than the young leaves. In contrast, total flavonoids old leaves were higher than the young leaves. The chloroform extract of young leaves had the highest cytotoxic activity with IC50 value of 11,37 microgram/ml. Bioactivity of agarwood leaves as antioxidant and anticancer towards HeLa cell line affected by the developmental stages of the leaves. Methanol extract of gaharu old leaves have the higehst antioxidant activity, whereas chloroform extract of gaharu young leaves have the highest anticancer activity.

Kata Kunci : Gyrinops versteegii, metabolit sekunder, antioksidan, sitotoksisitas, sel HeLa