Immobilisasi Lipase pada Kitosan Bead Menggunakan Asam Sitrat sebagai Penaut Silang dan Uji Aktivitas Hidrolisisnya

DIAN NUGRAHENI, Dr. Tri Joko Raharjo, M.Si; Dr. Respati Tri Swasono, M.Phil

2015 | Tesis | S2 Ilmu Kimia

Telah dilakukan penelitian tentang immobilisasi lipase pada kitosan bead dengan asam sitrat sebagai penaut silang serta diuji aktivitas hidrolisisnya. Tujuan penelitian ini adalah menggunakan asam sitrat sebagai penaut silang dalam immobilisasi lipase pada kitosan bead serta mengetahui stabilitas termal, penggunaan ulang, dan parameter kinetik lipase terimobilisasi. Kitosan bead dibuat dengan cara kitosan dilarutkan dalam larutan asam sitrat. Kondisi optimum konsentrasi asam sitrat dan kitosan dalam bead, pH dan waktu immobilisasi ditentukan dengan mengubah variabel yang mempengaruhi. Aktivitas hidrolisis lipase terimobilisasi dibandingkan dengan lipase bebas dengan mengkaji stabilitas termal, penggunaan ulang, dan parameter kinetik. Hasil penelitian menunjukkan pH 4 sebagai pH optimum immobilisasi. Lipase terimmobilisasi mempunyai aktivitas spesifik yang lebih rendah dibanding lipase bebas, namun memiliki kestabilan termal dan penggunaan ulang yang lebih baik. Afinitas enzim lipase terimmobilisasi terhadap substrat lebih rendah dibandingkan enzim bebasnya, ditandai dengan harga KM dan Vmaks. Harga KM enzim lipase terimmobilisasi dan lipase bebas berturut-turut adalah 17,66 x 10 pangkat -3 dan 9,80 x 10 pangkat -3 M, berbanding terbalik dengan harga Vmaks lipase terimmobilisasi 8,98 x 10 pangkat -6 M/menit yang lebih rendah dibandingkan Vmaks lipase bebas 9,98 x 10 pangkat -6 M/menit.

Immobilization of lipase on chitosan bead using citric acid as crosslinker and its hydrosysis activity have been investigated. The aims of this research are to confirm whether citric acid can be used as crosslinker on immobilization of lipase on chitosan bead and to observe thermal stability, reusability, and kinetic parameter of immobilized lipase in hydrolisis activity. Chitosan bead was made by dissolving chitosan powder into citric acid solution. Optimum concentration of citric acid and chitosan on bead, pH and time of lipase immobilization were determined by varying these variables. Thermal stability, reusability, and kinetic parameter of immobilized lipase were studied in hydrolysis activity and compared to those of free lipase. The result shows that pH 4 is the optimum pH for immobilization of lipase. Immobilized lipase has specific activity lower than that of free lipase, however thermal stability and reusability are higher than those of free lipase. Afinity of immobilized lipase towards substrate lower than that of free lipase as shown by values of KM and Vmaks . KM value of immobilized lipase and free lipase are 17,66 x 10 pangkat -3 dan 9.80 x 10 pangkat -3 M, respectively. Vmaks value of immobilized lipase is 8.98 x 10 pangkat -6 M/min lower than that of free lipase which is 9.98 x 10 pangkat -6 M/min.

Kata Kunci : immobilisasi, lipase, asam sitrat, kitosan bead, aktivitas hidrolisis