POTENSI ANTIMETASTASIS KOMBINASI EKSTRAK ETANOLIK EMULAWAK (Curcuma xanthorrhiza), BUAH MAKASSAR (Brucea javanica) DAN DOXORUBICIN PADA SEL 4T1

IKA RAHMAWATI SUTEJO, Prof. Dr. Edy Meiyanto, M.Si., Apt.; Dr. Riris Istighfari Jenie, M.Si., Apt.

2015 | Tesis | S2 Bioteknologi

Penggunaan doxorubicin tunggal sebagai agen kemoterapi utama pada kanker payudara stadium lanjut terkendala efek terapi yang kurang optimal, resistensi dan efek samping. Oleh karena itu, penggunaan doxorubicin perlu dikombinasikan dengan agen kemopreventif yang mempunyai mekanisme kerja pada target molekuler berbeda. Penelitian ini bertujuan mengkaji aktivitas sitotoksik dan penghambatan metastasis kombinasi ekstrak etanolik temulawak, buah Makassar dan doxorubicin pada sel kanker payudara 4T1. Uji sitotoksisitas ekstrak etanolik temulawak, buah Makassar dan doxorubicin tunggal maupun kombinasi dilakukan menggunakan MTT assay. Uji apoptosis dilakukan menggunakan flowcitometry. Pengamatan aktivitas antimetastasis ketiga agen terapi dan kombinasinya dilakukan menggunakan scratch wound healing assay dan gelatin zymograf. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak etanolik temulawak, buah Makassar dan doxorubicin tunggal bersifat toksik pada sel 4T1 dengan nilai IC50 berturut-turut sebesar 50 mikrogram/mL, 60 mikrogram/mL dan 1,2 mikromolar. Kombinasi ketiganya dengan konsentrasi masing-masing 1/2 IC50 bersifat sinergis dengan nilai CI sebesar 0,63, mampu menurunkan viabilitas sel 4T1 hingga 65%. Kombinasi ekstrak etanolik temulawak, buah Makassar dan doxorubicin dengan konsentrasi masing-masing 1/2 IC50 meningkatkan apoptosis sebesar 31% dan nekrosis sebesar 41%. Kombinasi ketiga agen tersebut terbukti menghambat migrasi sel 4T1 dan menurunkan aktivitas MMP9 yang berperan dalam proses invasi dan metastasis. Hasil penelitian ini menyimpulkan bahwa kombinasi ekstrak etanolik temulawak, buah Makassar dan doxorubicin berpotensi dikembangkan sebagai agen terapi kanker payudara stadium lanjut.

The use of Doxorubicin as main agent of chemotherapy for advanced breast cancer is constrained by less optimized therapeutic effects, resistance and side effects, such as cardiotoxicity. Therefore we need a combination of more than one chemo preventive agent which has different molecular targets. The purpose of this study is to assess the cytotoxic activity and metastasis inhibition from the combination of ethanolic extracts of temulawak, buah Makassar and doxorubicin in 4T1 breast cancer cell. In this study, cytotoxic activity of ethanolic extracts of temulawak, buah Makassar and doxorubicin, both single and combined, were analyzed by using MTT assay, followed by an experiment of apoptosisinduction by using flowcytometer. To investigate metastasis inhibition of its combination, scratch wound healing assay and gelatin zymograf were conducted. The results showed that ethanolic extracts of temulawak, buah Makassar and doxorubicin has cytotoxic activity on 4T1 cells with the value of IC50 respectively 50 mikrogram/mL, 60 mikrogram/mL and 1.2 mikromolar. Furthermore, its combination revealed sinergistic effect on 4T1 cells with CI value as high as 0.63 and decrease cell viability up to 65% through the induction of apoptosis and necrosis. Its combination has also shown to have better antimetastasis activity rather than single use of doxorubicin via inhibition of 4T1 cell migration and a decrease in MMP9 activity, which plays role in cells invasion and metastasis. These results showed that the combination of ethanolic extract of temulawak, buah Makassar and doxorubicin is potential to be developed as co-chemotherapeutic agent in advanced breast cancer and further study on its molecular mechanism need to be explored.

Kata Kunci : temulawak, buah Makassar, doxorubicin, apoptosis, metastasis, 4T1