Pengembangan dan Validasi Metode Analisis Atorvastatin dalam Plasma Manusia secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

ADI YUGATAMA, Dr. RR. Endang Lukitaningsih, M.Si., Apt.; Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt.

2015 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Atorvastatin merupakan salah satu turunan statin yang banyak tersedia secara komersial dalam sediaan farmasi untuk pengobatan dislipidemia. Atorvastatin berakhir masa patennya pada tahun 2011 sehingga mengakibatkan indutri farmasi dapat membuat obat copy-nya. Salah satu syarat dalam mengembangkan obat copy adalah perlu dilakukannya uji bioavailabilitas dan bioekivalensi. Tujuan dari penelitian ini adalah mengembangkan dan memvalidasi metode analisis atorvastatin dalam plasma manusia secara KCKT yang lebih sederhana dengan standar internal natrium diklofenak. Sistem KCKT yang digunakan dalam penelitian ini terdiri dari fase diam kolom fase terbalik Luna Phenomenex C18 (250 mm x 4,6 mm i.d., 5 mikrometer), fase gerak campuran asetonitril dan air pH 3 (70 : 30 % v/v), kecepatan alir 0,7 mL/menit dengan detektor UV 240 nm. Validasi metode yang dilakukan meliputi: selektivitas, limit of detection (LOD), lower limit of quantitation (LLOQ), linearitas, presisi, akurasi, stabilitas, dan robustness. Hasil validasi menunjukkan bahwa metode yang dikembangkan memiliki selektivitas, akurasi, presisi, dan robustness yang baik untuk penetapan kadar atorvastatin dalam plasm manusia. Rentang linearitas berada pada 20-200 ng/mL dengan r = 0,9960. Nilai LOD dan LLOQ sebesar 10 dan 20 ng/mL. Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa metode analisis yang dikembangkan untuk penetapan kadar atorvastatin dalam plasma manusia memenuhi persyaratan validasi menurut Guidance for Industry: Bioanalytical Method Validation.

Atorvastatin is one of statin derivative which is widely available commercially in pharmaceutical dosage form for dyslipidemia treatment. Atorvastatin patent has expired since 2011, allowing pharmaceutical industries could produce its copies. One of the requirements in developing copy drug is to meet the requirement of bioavailability and bioequivalence test. The aim of this study is to develope and validate the simple atorvastatin analytical method in human plasma using HPLC with sodium diclofenac as an internal standard. HPLC system used in this experiment consisted of column Luna Phenomenex C18 (250 mm x 4,6 mm i.d., 5 micrometer) as the stationary reverse phase chromatography, a mixture of acetonitrile-water at pH 3 (70 : 30 % v/v) as the mobile phase, flow rate of 0,7 mL/min, and UV detector at wavelength of 240 nm. Validation methods were including: selectivity, limit of detection (LOD), lower limit of quantitation (LLOQ), linearity, precision, accuracy, stability, and robustness. Validation result showed that developed method have a good selectivity, accuracy, precision and robustness for atorvastatin assay in human plasma. Linearity range were at 20-200 ng/mL with r = 0,9960. LOD and LLOQ were 10 and 20 ng/mL, respectively. Therefore, it can be concluded that developed method for atorvastatin assay in human plasma analysis were fulfilling validation requirements according to Guidance for Industry: Bioanalytical Method Validation.

Kata Kunci : Atorvastatin, KCKT-UV, plasma, validasi/ Atorvastatin, HPLC-UV, plasma, validation