PENELUSURAN SENYAWA ANTIBAKTERI EKSTRAK ETIL ASETAT KULTUR FUNGI ENDOFIT KODE DJ2 DARI DAUN JINTEN (Coleus amboinicus Lour.)

ROLLANDO, Dr. Puji Astuti, M.Sc.,Apt ; Prof. Dr. Subagus Wahyuono, M.Sc.,Apt.

2015 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Ekstrak etil asetat dari hasil fermentasi fungi endofit kode DJ2 dari daun jinten melalui uji bioautografi dan Kirby-Bauer terbukti mempunyai aktivitas antibakteri. Berdasarkan penelitian tersebut, fungi endofit kode DJ2 memiliki potensi untuk dikembangkan sebagai sumber penghasil senyawa antibakteri yang baru. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa antibakteri dalam ekstrak etil asetat kultur fungi endofit kode DJ2. Fermentasi dilakukan menggunakan medium PDB selama 14 hari untuk menghasilkan metabolit sekunder dan medium diekstraksi dengan etil asetat. Metode pemisahan dan pemurnian menggunakan KLT preparatif dan kromatografi cair kinerja tinggi. Uji antibakteri fraksi dalam proses skrining aktivitas dilakukan dengan metode disc diffusion dan uji antibakteri isolat dilakukan dengan metode mikrodilusi untuk menentukan nilai IC50 dan KBM. Isolat aktif antibakeri diidentifikasi dengan spektrofotometer IR, LC-MS, 1H-NMR, 13C-NMR, dan DEPT. Hasil skrining aktivitas antibakteri menunjukan fraksi 2 dan 4 merupakan fraksi yang paling aktif. Isolat 2.2 mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, dan Salmonella typhi dengan nilai IC50 masing-masing berurutan sebesar 1,24; 1,17; 1,27; 0,73; 0,31; 1,19 μg/mL dan nilai KBM masing-masing berurutan sebesar 20,00; 20,00; 40,00; 40,00; 10,00; 10,00 μg/mL. Isolat 4.1 mempunyai aktivitas antibakteri terhadap B.subtilis, E.coli, P.aeruginosa, S.aureus, S.mutans, dan S.typhi dengan nilai IC50 masing-masing berurutan sebesar 2,69; 1,35; 1,33; 0,86; 0,24; 1,90 μg/mL dan nilai KBM masing-masing berurutan sebesar 40,00; 40,00; 40,00; 40,00; 20,00; 20,00 μg/mL. Spektra IR, LC-MS, 1H-NMR, 13C-NMR, dan DEPT menunjukkan struktur parsial isolat 2.2 adalah senyawa alifatis yang mengandung gugus karbonil tersubstitusi.

Ethyl acetate extracts of endophytic fungi fermented DJ2 code of cumin leaves through bioautografi test and kirby-bauer shown to have antibacterial activity. Based on these studies, endophytic fungi DJ2 code has the potential to be developed as a source of new antibacterial compounds. This study aimed to isolate and identify the antibacterial compound in ethyl acetate extracts of endophytic fungi culture DJ2 code. The fermentation was carried out using the PDB as medium for 14 days to produce the secondary metabolites and the medium was extracted with ethyl acetate. Separate and purify methode was done using TLC, TLC preparative, and liquid chromatography. The test antibacterial activity fractions in the screening process conducted by the disc diffusion method and antibacterial test isolates carried out by microdilution method for determining the value of IC50 and MBC. Active isolat was characterized by IR, LC-MS, 1H-NMR, 13C-NMR, and DEPT. Data from screening antibacterial activity showed that fraction 2 and 4 have the highest antibacterial activity. The isolate 2.2 has antibacterial activity against Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, and Salmonella typhi with IC50 values respectively by 1,24; 1,17; 1,27; 0,73; 0,31; 1,19 μg/mL and MBC values respectively by 20,00; 20,00; 40,00; 40,00; 10,00; 10,00 μg/mL. The isolate 4.1 has antibacterial activity against B.subtilis, E.coli, P.aeruginosa, S.aureus, S.mutans, and S.typhi with IC50 values respectively by 2,69; 1,35; 1,33; 0,86; 0,24; 1,90 μg/mL and MBC values respectively by 40,00; 40,00; 40,00; 40,00; 20,00; 20,00 μg/mL. The infrared, mass spectra, 1H-NMR, 13C-NMR, and DEPT signals confirm that partial structure of isolate 2.2 is aliphatic compound having substituted carbonyl moiety.

Kata Kunci : Endophytic, Rhizoctonia sp, IC50, MBC, structure elucidation.