ANALISIS EKSPREI GEN SAP (4-6) DAN PEMBENTUKAN HIFA ISOLAT CANDIDA ALBICANS DARI PENDERITA HIV POSITIF DAN KOMENSAL PADA ORANG SEHAT

VITA MEYLANI, Prof. Drs. Langkah Sembiring, M.Sc., Ph.D.

2015 | Tesis | S2 Biologi

Ekspresi gen SAP 4-6 berdasarkan kemampuan pembentukan hifa dan deteksi mRNA diteliti pada isolat Candida albicans yang berasal dari penderita candidiasis oral HIV positif dan komensal orang sehat. Strain anggota spesies C. albicans diisolasi secara selektif dari kedua sumber (habitat) dengan menggunakan media CHROMagar. Isolat yang diperoleh kemudian diinduksi dengan menggunakan media penginduksi gen SAP 4-6. Analisis ekspresi gen dilakukan melalui dua mekanisme yaitu secara morfogenesis melalui pembentukan hifa dan secara molekular dengan menggunakan metode RT-PCR. Frekuensi C. albicans pada populasi sampel diukur dengan menghitung persentase sampel yang membawa C. albicans. Ukuran hifa dan kecepatan pembentukan hifa diukur berdasarkan waktu yang dibutuhkan C. albicans untuk morfogenesis. Frekuensi C. albicans yang berasal dari penderita HIV mencapai 40%, sedangkan pada orang sehat hanya 15%. Pengukuran panjang hifa C. albicans pada penderita candidiasis oral HIV positif dengan berbagai waktu inkubasi menunjukkan rerata yang lebih tinggi (15,7 µm) dibandingkan dengan yang komensal pada orang sehat (12,9 µm). Pengamatan morfogenesis hifa menunjukkan bahwa isolat C. albicans dari penderita candidiasis oral HIV positif lebih cepat mengalami morfogenesis dibandingkan dengan isolat komensal pada orang sehat. Kecepatan pembentukan hifa isolat yang berasal dari penderita candidiasis oral HIV positif lebih cepat dibandingkan dengan isolat komensal pada orang sehat. Analisis ekspresi gen secara molekular menunjukkan bahwa isolat CH3 yang berasal dari penderita candidiasis oral HIV positif mengekspresikan gen SAP 4-6 sementara isolat komensal yang berasal dari orang sehat tidak ada yang terekspresi. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa analisis ekspresi gen SAP 4-6 secara morfogenesis pada ketiga puluh isolat terekspresi yang ditandai dengan adanya pembentukan hifa, akan tetapi secara molekular hanya satu isolat dari penderita candidiasis oral HIV positif (CH3) yang dapat mengekspresikan gen SAP 4-6 sementara isolat komensal yang berasal dari orang sehat tidak ada yang terekspresi.

Gene expression of SAP 4-6 based on the ability of hyphae formation and detection of mRNA was observed in Candida albicans isolates from HIV-positive patients with oral candidiasis and commensal healthy people. Members of the species of C. albicans strains selectively isolated from both sources (habitat) using CHROMagar medium. Isolates were then induced to express SAP 4-6 by using gene inducers media SAP 4-6. Analysis of gene expression was performed by two mechanisms, namely morphogenesis by the formation of hyphae and molecular basis by using RT-PCR. The frequency of C. albicans in the sample population was measured by calculating the percentage of samples that carry C. albicans. Length of hyphae and hyphae formation rate is measured by the time required for the morphogenesis of C. albicans. The frequency of C. albicans from HIV reached 40%, whereas in healthy people was only 15%. Measuring the length of hyphae of C. albicans oral candidiasis in HIV-positive patients with various incubation times showed a higher average (15.7 μm) compared with the commensal in healthy individuals (12.9 μm). Hyphal morphogenesis observations indicated that C. albicans isolates from HIV-positive patients with oral candidiasis was faster than commensal isolates in healthy people. Hyphae formation rate of the isolates from HIV-positive patients with oral candidiasis were also faster than commensal isolates in healthy people. Molecular analysis of gene expression showed that isolates CH3 derived from HIV-positive patients with oral candidiasis could express SAP 4-6 gene while commensal isolates from healthy people could not. Based on the results of this study it could be concluded that the isolates derived from both HI-postive patients and healthy people could express the SAP 4-6 gene in terms of hyphae formation. However, in terms of molecular detection only isolates derived from HIV-positive patients (CH3) could express its SAP4-6 gene.

Kata Kunci : Candidiasis oral, HIV, komensal, SAP 4-6, hifa