Penyisipan Gen Pelapor GFP (Green Fluorescent Protein) Pada pGAS 101 Pembawa Gen PaFT1 Untuk Pembungaan Anggrek Phalaenopsis amabilis (L.) Blume

MUHAMMAD DYLAN L, Dr. Endang Semiarti, M.S., M.Sc.

2014 | Skripsi | BIOLOGI

Insersi gen GFP pada T-DNA pembawa gen pembungaan anggrek PaFT1 telah dilakukan. Insersi tersebut bertujuan untuk memperoleh T-DNA yang dilengkapi dengan gen pelapor sehingga akan memudahkan screening terhadap transforman PaFT1. Penelitian dilakukan dengan memisahkan fragmen 35S-GFP dari plasmid pSK35S-GFP lalu disisipkan ke plasmid pGAS 101 yang membawa gen PaFT1. Hasil penyisipan berupa plasmid pGAS-GFP digunakan untuk mentransformasi Escherichia coli strain DH5a dan dianalisis secara molekular menggunakan teknik colony PCR serta dilihat ekspresi gen GFP pada koloni E. coli transforman. Hasil analisis menunjukkan bahwa gen GFP dapat terintegrasi dengan baik pada plasmid pGAS 101, dapat terekspresi pada koloni E. coli transforman dan memiliki stabilitas yang baik.

GFP gene insertion on PaFT1 orchid flowering gene carried T-DNA has performed. The purpose is to acquiring T-DNA armed with reporter gene therefore simplify screening on PaFT1 transformant. The research has done by separating P35S-GFP fragment from pSK35S-GFP plasmid and ligated it to pGAS 101 plasmid which carries PaFT1 gene. The resulted plasmid pGAS-GFP then used to transform Escherichia coli strain DH5a and analyzed by colony PCR and its GFP expression on transformant colony. Analysis results show that GFP gene has integrated into pGAS 101 plasmid, expressed on transformant colony and has good stability.

Kata Kunci : GFP gene, PaFT1 gene, pGAS 101, E. coli strain DH5a, colony PCR