ISOLASI, KARAKTERISASI, DAN IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT DENGAN AKTIVITAS FITASE DARI MAKANAN TRADISIONAL TERFERMENTASI

FEBIYANI NDARU RATISHIWI, Prof. Langkah Sembiring, M.Sc., Ph.D. ; Ema Damayanti, M. Biotech.

2014 | Skripsi | BIOLOGI

Untuk mendapatkan Bakteri Asam Laktat (BAL) dengan aktivitas fitase pada makanan tradisional terfermentasi maka dilakukan penelitian isolasi, karakterisasi dan identifikasi BAL dari tempe gembus, tempe kedelai, tempe lamtoro dan tempe kara benguk yang di dapatkan dari wilayah Kabupaten Gunung Kidul, Yogyakarta. Isolasi BAL dilakukan dengan menggunakan metode Total Plate Count (TPC) pada medium de Man Rogosa Sharpe Agar (MRSA) yang disuplementasi dengan CaCO�¬3. Isolat yang diduga sebagai BAL diseleksi kemampuan aktivitas fitasenya dengan menggunakan metode kualitatif secara streakplate dengan medium modifikasi de Man Rogosa Sharpe-Morpholino Propanesulfonic Acid (MRS-MOPS) yang mengandung natrium fitat. Isolat dengan aktivitas fitase diuji dengan metode kuantitatif menggunakan spektrofotometer. Optimasi pertumbuhan dilakukan untuk produksi fitase pada dua isolat terpilih. Satu isolat dengan aktivitas tertinggi selanjutnya dikarakterisasi dan diidentifikasi dengan menggunakan kit API 50 CH. Hasil penelitian menunjukkan bahwa diperoleh 18 isolat BAL dari 4 jenis sampel makanan tradisional. Hasil screening aktivitas fitase dengan menggunakan metode kualitatif menghasilkan 13 isolat yang mampu melakukan degradasi fitat. Kemudian untuk hasil uji aktivitas fitase menggunakan metode kuantitatif didapatkan sebanyak 2 isolat dengan aktivitas fitase tertinggi yaitu isolat TG-2 dan TG-1 dari tempe gembus. Isolat TG-2 memiliki aktivitas fitase sebesar 23,56 U/mL, diikuti TG-1 sebesar 19,64 U/mL. Pada optimasi pertumbuhan di dapatkan produksi fitase terbaik yakni pada kondisi agitasi suhu inkubasi 37 derajad C untuk isolat TG-2 dan kondisi tanpa agitasi suhu inkubasi 45 derajad C untuk isolat TG-1. Isolat TG-2 dipilih untuk dikarakterisasi dan diidentifikasi. Berdasarkan karakteristik dan hasil identifikasi dengan kit API 50 CH, isolat TG-2 diketahui sebagai salah satu anggota strain Lactobacillus fermentum dengan persentase kemiripan 98,5 persen. Dengan demikian, dapat disimpulkan bahwa isolat BAL dengan aktivitas fitase tertinggi terdapat pada tempe gembus.

In order to obtain Lactic Acid Bacteria (LAB) with phytase activity from traditional fermented food, research was conducted by isolation, characterization and identification of LAB from several tempeh derived from gembus, soy, leucaena and kara benguk in Gunung Kidul, Yogyakarta. Isolation of LAB was performed using Total Plate Count (TPC) on de Man Rogosa Sharpe Agar (MRSA) medium supplemented with CaCO3. Evaluation of phytase activity of selected LAB isolates was done using qualitative streakplate method with modified de Man Rogosa-Morpholino Propanesulfonic Acid Sharpe (MRS-MOPS) medium containing sodium phytate. Isolates which had phytase activities were tested using quantitative method with spectrophotometer. The growth and phytase activity of two selected isolates were optimized. Furthermore, isolate with the highest phytase activity was characterized and identified using API 50 CH kit. The results showed that there were 18 LAB isolates obtained from samples. Qualitative screening of phytase activity presented 13 isolates. Quantitative test showed that two isolates from gembus tempeh, including TG-1 and TG-2 had the highest phytase activity. The phytase activity of TG-2 isolate was 23.56 U/mL while TG-1 was 19.64 U/mL. The phytate activity of TG-2 was optimum at 37C with agitation while the phytate activity of TG-1 was optimum at 45C without agitation. Characterization and identification of TG-2 isolate showed that the isolate has 98,5 percent similarity with Lactobacillus fermentum. LAB isolate with high phytase activity could be isolated from gembus tempeh.

Kata Kunci : bakteri asam laktat, tempe gembus, aktivitas fitase, kit API 50 CH