Ekspresi mRNA Caspase 3 Sel Kanker Payudara T47D (Human Breast Cancer Cell Line) yang Diinduksi Ekstrak Daun Jeruk Purut (Citrus hystrix)

NUR AFRA, Dr. biol. hom. Nastiti Wijayanti, M.Si;Woro Anindito Sri Tunjung, M.Sc, Ph.D

2014 | Skripsi | BIOLOGI

Jeruk purut (Citrus hystrix Dc.) merupakan tanaman asli Asia Tenggara mengandung flavonoid, kumarin dan limonoid yang tergolong kedalam senyawa kemoprevensi. Kemoprevensi merupakan senyawa yang dapat digunakan untuk menghambat, menunda, atau menginduksi apoptosis pada kanker. Flavonoid dari ekstrak etil asetat dapat menginduksi apoptosis dengan mengaktifkan caspase 8. Caspase 8 membelah BID (keluarga Bcl-2) dan mengaktifkan sitokrom c. Sitokrom c bersama Apaf-1 membentuk CARD (Caspase Recruitment Domain). CARD akan bergabung dan membentuk apoptosome kemudian mengikat pro caspase 9 dan mengaktivasinya menjadi caspase 9. Selanjutnya caspase 9 mengaktifkan caspase 3 dan menyebabkan apoptosis. Penelitian ini bertujuan untuk melihat ekspresi caspase-3 pada sel T47D setelah diberi perlakuan dengan ekstrak etil asetat dan kloroform daun jeruk purut (Citrus hystrix DC.). Ekspresi caspase 3 dilihat dengan Two-Step Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR) dan PCR dikerjakan dengan menggunakan primer spesifik kemudian hasilnya divisualisasikan menggunakan UV transiluminator. Hasil penelitian menunjukkan dari lima sampel yakni perlakuan Doxorubicin, DMSO, kontrol sel, etil asetat dan kloroform hanya doxorubicin dan etil asetat yang mengekspresikan caspase 3. Dalam ekstrak daun jeruk purut dengan pelarut etil asetat mengandung flavonoid yang dapat menginduksi apoptosis.

Kaffir lime (Citrus hystrix Dc.) is native indigenous species in Southeast Asia contains flavonoids, coumarins and limonoids were classified into chemoprevention compounds. Chemoprevention is a compound that can be used to hinder, delay, or induce apoptosis in cancer. Flavonoids from ethyl acetate extracts can induce apoptosis by activating caspase 8. Caspase 8 cleave BID (Bcl-2 family) and activates cytochrome c. Cytochrome c with Apaf-1 to form CARD (Caspase Recruitment Domain). CARD will merge to form apoptosome then bind and activate pro-caspase 9 into caspase 9. Caspase 9 activate caspase 3 and leads to apoptosis. This study aimed to examine the expression of caspase-3 in T47D cells after treated with ethyl acetate and chloroform extracts of leaves of kaffir lime (Citrus hystrix Dc.). Caspase 3 expression seen with the Two-Step Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR) and PCR performed using specific primers and then the results were visualized using UV transiluminator. he results showed that five samples of doxorubicin treatment, DMSO, control cells, ethyl acetate and chloroform. Only ethyl acetate and doxorubicin can expressing caspase 3. In the kaffir lime leaf extract with ethyl acetate contains flavonoids that can induce apoptosis.

Kata Kunci : Keywords: Citrus hystrix Dc., Ethyl acetate, Caspase 3, Flavonoids