UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK ETIL ASETAT FUNGI TBF-05 DAN PENDEKATAN GOLONGAN SENYAWA AKTIF

DEAZTY CAPRINA MINJARANI, Dr. Puji Astuti, M.Sc., Apt

2014 | Skripsi | FARMASI

Salah satu cara untuk mengatasi permasalahan resistensi antimikroba saat ini adalah dengan penemuan senyawa antimikroba baru yang poten terhadap berbagai mikroba, baik yang sudah resisten maupun yang belum resisten. Tanah merupakan sumber mikroorganisme yang potensial karena mengandung berbagai nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan mikroorganisme tersebut. Banyak senyawa antimikroba berhasil diisolasi dari mikroorganisme tanah. Oleh karena itu diteliti senyawa antimikroba yang terdapat di dalam kultur fungi TBF-05 yang diisolasi dari tanah kebun herbal Bagian Biologi Farmasi UGM. Kultur TBF-05 difermentasi pada media Potato Dextrose Broth (PDB). Senyawa antimikroba yang dihasilkan selama proses fermentasi diekstraksi dengan menggunakan pelarut etil asetat dan diuapkan hingga didapatkan ekstrak kental. Ekstrak diuji aktivitas antimikrobanya dengan metode disc diffusion dilanjutkan dengan mikrodilusi untuk mengetahui nilai KHM dan KBMnya. Uji KLT-bioautografi dilakukan untuk mengetahui senyawa yang berperan terhadap aktivitas antimikroba dari ekstrak. Aktivitas antimikroba ditunjukkan dengan terbentuknya zona hambat dan kejernihan media setelah inkubasi. Senyawa yang berperan terhadap aktivitas antimikroba ekstrak kemudian diidentifikasi golongan senyawanya dengan berbagai pereaksi semprot. Ekstrak etil asetat TBF-05 hanya memberikan hambatan pertumbuhan terhadap bakteri Escherichia coli pada uji difusi, namun menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap bakteri Gram positif (Staphylococcus aureus dan Bacillus subtilis) maupun Gram negatif (Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa) pada uji KLT-bioautografi. Pada sistem KLT dengan fase diam silika gel 60 F254, fase gerak kloroform : metanol (4:1), dan jarak elusi 8 cm, golongan senyawa aktif antimikroba terdapat pada bercak hRf 94 kemungkinan adalah senyawa keton, aldehid, alkaloid, orto-hidroksikarbonil atau orto-dihidroksikarbonil. Golongan senyawa bercak lain yang memiliki aktivitas antimikroba (hRf 59 dan hRf 82) belum dapat diketahui dengan pereaksi semprot yang digunakan.

Finding a new antimicrobial agent with high potency against wide range strain of microbes is one way of solving the microbial resistance problem throughout the world. Soil is well known as a potential source of microorganism as it contains various nutritions needed for microbial growth. Based on that, antimicrobial agent present in TBF-05 fungal culture that was isolated from the soil in herb garden of Biology Pharmacy section in UGM were investigated. TBF-05 culture was fermented in Potato Dextrose Broth (PDB) medium. The antimicrobial compounds produced during fermentation process then extracted using ethyl acetate solvent, and evaporated. The antimicrobial activity of TBF-05 extract were tested using disc diffusion method (Kirby Bauer test) and followed by microdilution test to obtain its MIC value. The TLC-bioautography test was conducted to know compound contributing antimicriobial activities in TBF-05 extract. Growth inhibition zone and medium clarity after incubation was observed as extracts antimicrobial activity. Antimicrobial active compound on TBF-05 extracts classes then being identified using various spray reagents. Ethyl acetate extract of TBF-05 only inhibits the growth of Escherichia coli on the disc diffusion method, but showed growth inhibition against both Gram-positive (Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis) or Gram-negative (Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa) bacterias on the TLC-bioautography test. Using TLC system with stationary phase silica gel 60 F254, mobile phase chloroform : methanol (4:1), and eluted 8 cm long, classes of antimicrobial active compound found in hRf 94 might be ketones, aldehydes, alkaloids, ortho-hydroxycarbonyl or ortho-dihydroxycarbonyl. Using the spray reagents in this study, classes of another antimicrobial active compounds found in hRf 59 and hRf 82 had not yet to be known.

Kata Kunci : fungi TBF-05, antimikroba, fermentasi