INDUKSI KOLKISIN PADA KALUS DAUN Catharanthus roseus (L.) G. Don. DAN PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPISNYA

SEPTI ROSALIA LATIFAH, Djoko Santosa, S.Si., M.Si.

2014 | Skripsi | FARMASI

Catharantus roseus (L.) G. Don. atau tapak dara adalah tanaman perdu yang senyawa aktifnya terutama alkaloid, namun jumlahnya kecil. Pemuliaan tanaman dilakukan agar diperoleh tanaman unggul dengan rekayasa genetik. Kolkisin dapat digunakan sebagai mutagen. Sel kalus yang meristemoid lebih mudah diintervensi oleh faktor eksternal. Sel dari kultur kalus dapat digunakan untuk pengamatan dalam waktu singkat. Oleh karena itu, dilakukan induksi kolkisin pada kalus tapak dara. Penanaman eksplan secara aseptis pada media Murashige-Skoog padat diinkubasi selama 48 hari pada suhu 22-25oC. Kalus diinduksi dengan kolkisin 2,5x10-3 M selama 24 jam, 48 jam dan 72 jam dalam media Murashige-Skoog cair. Data-data sitologi sel-sel kalus hasil pengamatan di bawah mikroskop inverted dianalisis secara deskriptif. Profil kromatografi lapis tipis (KLT) fase diam silika gel 60 F254 ekstrak petroleum eter, kloroform dan metanol dianalisis secara kuantitatif dengan KLT-densitometri pada panjang gelombang 220 nm. Sel-sel kalus bersifat multinukleat dihasilkan pada perendaman kolkisin selama 48 jam, dan sel-sel kalus mengalami pembesaran seiring dengan lama perendaman. Bercak ekstrak kloroform dengan fase gerak metanol:kloroform (1:1) hRf 96 dan ekstrak metanol dengan fase gerak metanol:kloroform (3:1) hRf 81 bereaksi positif dengan Dragendorff dan natrium nitrit. Ekstrak kloroform memiliki luas area per gram sampel lebih dari 100 kali luas area per gram ekstrak metanol.

Catharanthus roseus (L.) G. Don. or rose periwinkle is an evergreen shrub plant which has alkaloid as active constituent, but in a small amount. Plant breeding is carried in order to obtain the excellent plant by genetic engineering. Colchicine can be used as mutagen. Meristemoid callus cells are easier to be intervened by external factor. Cells from callus culture are able to be used for short period observation. Hence, colchicine induction in rose periwinkle is carried. Explants were aseptically planted in solid Murashige-Skoog media, incubated for 48 days in temperature of 22-25 oC. Callus was induced by colchicine 2,5x10-3 M in 24 hours, 48 hours and 72 hours using liquid Murashige-Skoog media. Cytology of callus cells data as the result of inverted microscope observation was analyze descriptively. Thin Layer Chromatography (TLC) profile using stationary phase silica gel 60 F254 of petroleum ether, chloroform and methanol extract were analyzed quantitatively by TLC-densitometry in 220 nm wavelength. Multinucleat callus cells were obtained by colchicine maceration in 48 hours, and enlarged by the time it were macerated. The spot of chloroform extract using mobile phase of methanol:chloroform (1:1) hRf 96 and methanol extract using mobile phase of methanol:chloroform (3:1) hRf 81 were reacted positively by Dragendorff and sodium nitrite. Chloroform extract had per gram sample area width larger 100 times than methanol extract.

Kata Kunci : Catharanthus roseus (L.) G. Don., kultur kalus, kolkisin, sitologi sel, KLT-densitometri