Pengaruh Hidrolisis Asam dan Waktu Hidrolisis terhadap Uji Penangkapan Radikal 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) pada Fraksi Air Ekstrak Etanolik Batang Brotowali (Tinospora crispa (L.) Miers.)

HANIFAH RIDHA R, Dr. Tatang Irianti, M.Sc., Apt.

2014 | Skripsi | FARMASI

Dewasa ini, penggunaan antioksidan alami untuk menangkal timbulnya penyakit yang diinisiasi oleh radikal bebas semakin diminati. Salah satu sumber antioksidan alami yaitu batang brotowali. Ekstrak etanolik, fraksi etil asetat, dan fraksi air dari batang brotowali diketahui memiliki aktivitas antiradikal namun tergolong lemah. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh perlakuan hidrolisis asam pada fraksi air batang brotowali dalam peningkatan aktivitas penangkapan radikal DPPH. Fraksi air batang brotowali dihidrolisis dengan HCl 2 N kemudian diukur aktivitas antioksidan melalui uji penangkapan radikal DPPH dengan spektrofotometer UV-Vis. Untuk mengetahui senyawa dalam fraksi air yang berperan sebagai antioksidan digunakan analisis kualitatif KLT. Warna bercak dan hRf pada profil kromatogram diamati di bawah sinar UV254, UV366, dan pasca penyemprotan dengan uap amonia (NH3), pereaksi semprot AlCl3, FeCl3, dan DPPH. Nilai IC50 dari fraksi air, fraksi air terhidrolisis 1 jam, dan fraksi air terhidrolisis 3 jam dianalisis statistika dengan uji Paired-samples T Test pada SPSS for Windows 16.0 untuk mengetahui adanya pengaruh hidrolisis asam dan waktu hidrolisis. Pada penelitian, fraksi air terhidrolisis 3 jam memiliki aktivitas penangkapan radikal paling besar dengan IC50 18,26 µg/mL, lebih baik dibandingkan fraksi air dengan IC50 sebesar 33,75 µg/mL. Senyawa yang terdapat dalam ekstrak dan fraksi batang brotowali diduga adalah flavonoid bentuk glikosida dan aglikon. Hidrolisis selama 3 jam pada fraksi air ekstrak etanolik batang brotowali diduga mampu membebaskan aglikon flavonoid dari bentuk glikosidanya, sehingga meningkatkan aktivitas penangkapan radikal DPPH.

Nowdays, the use of natural antioxidants to counteract the disease initiated by free radicals is increasingly in demand. Ethanol extract, ethyl acetate fraction, and water fraction of brotowali stems known to have antiradical activity but relatively low. This study aims to determine the effect of acid hydrolysis in order to increase the DPPH radical scavenging activity of the water fraction of brotowali stems ethanol extract. The water fraction of brotowali stems was hydrolyzed by using 2 N HCl for 1 and 3 hours. Antioxidant activity was measured through DPPH radical scavenging assay with a UV-Vis spectrophotometer. Qualitative TLC analysis was used to determine the compounds in the water fraction that act as antioxidant. Color spots and hRf on the chromatogram profiles were observed under UV254 and UV366, using ammonia (NH3) vapor, spray reagent AlCl3, FeCl3, and DPPH. To determine the influence of acid hydrolysis and hydrolysis time, IC50 values of water fraction, 1 hour hydrolyzed water fraction, and 3 hours hydrolyzed water fraction were analyzed statistically with Paired-samples T Test in SPSS for Windows 16.0. In this study, 3 hours hydrolyzed water fraction had the greatest radical scavenging activity with IC50 value of 18.26 µg/ mL, which was better than water fraction with IC50 value of 33.75 µg/mL. Compounds contained in the fractions and brotowali stem ethanol extracts was suspected to be flavonoids in glycoside and aglycone forms. Hydrolysis for 3 hours of the water fraction of brotowali stems ethanol extract apparently was able to release the aglycone form of flavonoids from its glycoside, thus increased the DPPH radical scavenging activity.

Kata Kunci : Tinospora crispa (L.) Miers., Radical scavenging, DPPH, acid hydrolysis