AKTIVITAS ANTIINFLAMASI FRAKSI TIDAK LARUT N-HEKSANA DARI EKSTRAK DIKLOROMETANA DAUN Plantago lanceolata L. DAN ANALISIS EKSPRESI COX-2

RINI SULISTYAWATI, Dr. rer. nat. Nanang Fakhrudin, M.Si., Apt.

2014 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Inflamasi merupakan reaksi lokal jaringan hidup terhadap suatu cedera atau jejas. Prostaglandin yang pembentukannya dimediasi oleh enzim siklooksigenase merupakan salah satu mediator yang dilepaskan pada proses inflamasi. Maka perlu dicari agen yang dapat mempengaruhi regulasi enzim siklooksigenase. Dari penelitian sebelumnya diketahui bahwa ekstrak diklorometana daun Plantago lanceolata L. menghambat mediator inflamasi NF-kB dan mengaktivasi PPARs secara invitro pada sel HEK293 (Human Embryonic Kidney serta menghambat migrasi leukosit. Untuk itu perlu diteliti apakah fraksi tak larut n-heksana dari ekstrak diklorometan daun Plantago lanceolata L. (FTLH) mempunyai aktivitas antiinflamasi secara in vivo dan in vitro. Telah dilakukan penelitian mengenai aktivitas antiinflamasi FTLH dengan melihat parameter volume udem, ekspresi COX-2 serta penghambatan terhadap COX-1 dan COX-2 untuk menilai selektivitasnya. Hewan uji dibagi dalam 6 kelompok. Kelompok kontrol negatif diinduksi karagenin pada kaki kiri belakang dan diberi pelarut minyak p.o, Kelompok kontrol positif diinduksi karagenin dan diberikan indometasin dosis 37,5 mg/kgBB dan diberi Na diklofenak dosis 19,5 mg/kgBB. Kelompok perlakuan masing–masing diberi FTLH dosis 39 mg/kgBB, 78 mg/kgBB dan 156 mg/kgBB. Volume udem pada kaki kiri belakang mencit diukur dengan pletismometer sebelum dan selama 6 jam setelah perlakuan. Kemudian dilakukan pengambilan jaringan pada bagian kaki untuk selanjutnya dilakukan pewarnaan imunohistokimia untuk menentukan COX-2. Penghambatan COX-1 dan COX-2 dilakukan dengan Colorimetric COX (ovine) Inhibitor Screening Assay kit (Cayman). Hasil penelitian menunjukkan FTLH memberikan aktivitas antiinflamasi dengan nilai daya antiinflamasi sebesar (22,84±6,52) %; (26,92±1,88)%; (31,74 ±5,72)% masing- masing pada dosis 39; 78 dan 156 mg/kgBB. FTLH juga mampu menurunkan ekspresi COX-2 sebesar (42,70±4,52)%; (53,89±2,05)%; (58,94 ±6,43)% pada dosis 39; 78 dan 156 mg/kgBB serta menghambat aktivitas COX-1 dengan nilai IC50 11,764 μg/ml dan COX-2 dengan persen penghambatan tertinggi 34,67% pada konsentrasi 40 μg/ml. Katakunci: antiinflamasi, Plantago lanceolata , siklooksigenase, udem

Inflammation is a local response of living tissue to an injury. Prostaglandin that formation catabolized by the cyclooxygenase enzyme is one of the mediators released on inflammation. It is necessary to look for an agent that can affect the regulation of the cyclooxygenase enzyme. From previous studies it is known that the dichloromethane extract of Plantago lanceolata leaves inhibits NF-kB inflammatory mediators and activate PPARs in vitro in HEK293 cells (Human Embryonic Kidney) and inhibits leukocyte migration. Therefore, in this study, we assessed whether the insoluble fraction of n-hexane from dichloromethane extract Plantago lanceolata (FTLH) leaves antiinflammatory activity in vivo and in vitro. Research on anti-inflammatory activity of standarized FTLH has done by looking at the volume of edema, expression of COX-2 and inhibition of COX-1 and COX-2 to assess selectivity. Mice were divided into 6 groups. Negative group control induced carrageenan on the left hind paw and solvent oils given orally, positive group induced carrageenan and given indomethacin 37.5 mg /kgBW and Na diclofenac at dose of 19.5 mg /kgBW, test group were treated FTLH at doses 39 mg /kgBW, 78 mg/kgBW and 156 mg/kgBW. The paw volume was measured with plethysmometer at 0 hr and for 6 hours after treatment. The removal of tissue on the foot for further immunohistochemical staining to determine COX-2. Inhibition of COX-1 and COX-2 was conducted by Colorimetric COX (ovine) Inhibitor Screening Assay kit (Cayman). The results showed FTLH provide anti-inflammatory activity with power value respectively by (22.84± 6,52)%; (26.92 ± 1,88)% and (31.74 ± 5,72) % for doses of 39, 78 and 156 mg / kgBW. Inhibition of COX-2 expression gave a value of (42.70 ± 4.52)%; (53.89± 2.05)% and (58.94 ± 6.43) % for doses of 39, 78 and 156 mg / kgBW. FTLH inhibit COX-1 activity that gave a percentage inhibition of IC50 COX-1 11,764 μg/ml and COX-2 at the highest inhibition 34,67% at 40 μg/ml. Keyword:antiinflammatory, Plantago lanceolata, cyclooxygenase, edema

Kata Kunci : antiinflamasi, Plantago lanceolata , siklooksigenase, udem