PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE PENETAPAN METFORMIN HIDROKLORIDA SECARA KCKT DALAM SPIKED PLASMA MANUSIA DAN PADA SEDIAAN TABLET

SISKA RUSMALINA, Dr, RR. Endang Lukitaningsih, M.Si., Apt

2014 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Metformin merupakan senyawa polar yang apabila dianalisis secara KCKT fase terbalik akan muncul pada waktu retensi yang cepat, hal ini menyulitkan pada penetapan kadar metformin dalam plasma karena terjadi overlapping antara peak senyawa metformin dengan peak senyawa–senyawa endogen dalam plasma. Untuk mengatasi hal tersebut maka digunakan reagen pasangan ion natrium dodesil sulfat (SDS). Tujuan penelitian ini adalah mengembangkan dan memvalidasi metode analisis penetapan kadar metformin dalam spiked plasma manusia dan pada sediaan tablet secara KCKT dengan menggunakan kolom fase terbalik Ascentis® Phenyl Supelco (250 mm x 4,6 mm i.d., 5 μm). Sistem KCKT terdiri dari fase diam kolom fase terbalik Ascentis® Phenyl (25 cm x 4,6 mm, ukuran partikel 5μm), fase gerak campuran asetonitril dan bufer fosfat KH2PO4 20 mM dan SDS 1 mM pH 4,0 ± 0,1 ditetapkan dengan asam ortho fosfat 10 % (30 : 70 % v/v), kecepatan alir 1,0 mL/menit dengan detektor UV- 234 nm. Validasi metode yang dilakukan meliputi: selektivitas, LOD, LOQ, linieritas, presisi, akurasi dan ketegaran (robustness). Hasil validasi menunjukkan bahwa metode yang dikembangkan memiliki selektivitas, akurasi, keterulangan dan presisi antara serta ketegaran (robustness) yang baik untuk penetapan kadar metformin HCl dalam spiked plasma manusia dan pada sediaan tablet. Rentang linieritas berada pada 0,1-7 μg/mL. LOD 29,0 dan LOQ 90,7 ng/mL. Kesimpulan, metode analisis yang dikembangkan dapat digunakan untuk penetapan kadar metformin HCl dalam spiked plasma manusia dan pada sediaan tablet.

Metformin is a polar compound if analyzed by reversed-phase of HPLC will appear in a fast retention time, this complicates the determination of metformin in plasma due to be overlapping between metformin peak compound with endogenous peak compounds in plasma. To solve it, ion pairing reagent sodium dodesil sulfate (SDS) is used. The purpose of this study is to develop and validate the analytical methods metformin assay in spiked human plasma and tablet dosage form by HPLC using a reversed-phase column Supelco Ascentis® Phenyl (length 250 mm, internal diameter 4.6 mm, particle size 5μm). HPLC system consisted of a reversed-phase column Ascentis® Phenyl (length 250 mm, internal diameter 4.6 mm, particle size 5μm) as a stationary phase, mixed mobile phase of acetonitrile and buffer phosphate KH2PO4 20 mM and SDS 1 mM pH 4.0 ± 0,1 adjusted with dilute ortho phosphoric acid 10 % (30 : 70 v/v), the flow rate 1.0 mL/minute, detected by UV detector 234 nm. The method was validated with the parameters selectivity, LOD, LOQ, linearity, precision, accuracy and robustness. The validation result shows that this method has selectivity, accuracy, repeatability and intermediate precision also good robustness for the determination of metformin HCl in spiked plasma and tablet dosage form. Range of linearity is on 0.1 - 7 mg/mL. LOD 29.0 ng/mL and LOQ 90.7 ng/mL. Conclusion, the analytical method that was developed can be used to determination metformin HCl in spiked human plasma and in tablet dosage form

Kata Kunci : Metformin, KCKT, Validasi, Plasma., Ascentis Phenyl