POTENSI FRAKSI AIR EKSTRAK ETANOLIK SARANG SEMUT (Hydnophytum formicarum Jack.) SEBAGAI PENGHAMBAT PATOGENITAS Pseudomonas aeruginosa PAO1 YANG DIPENGARUHI QUORUM SENSING

TRI ASTUTI HANA PERTIWI, Dr. rer. nat. Triana Hertiani, M.Si., Apt.

2014 | Skripsi | FARMASI

Resistensi antibiotik dewasa ini menjadi permasalahan global yang memicu penemuan obat antibiotik dengan mekanisme baru yang salah satunya dengan menghambat komunikasi mikroba yang dikenal dengan quorum sensing inhibition (QSi) terutama dari bahan alam. Ekstrak etanolik umbi tanaman sarang semut Hydnophytum formicarum Jack. yang berasal dari Bintuni, Papua Barat, telah dilaporkan positif sebagai anti-QS. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi fraksi air ekstrak etanolik H. formicarum terhadap patogenitas P. aeruginosa PAO1 yang aktivitasnya dipengaruhi QS. Ekstrak etanol yang diperoleh dari penelitian sebelumnya difraksinasi bertingkat menggunakan partisi cair-cair berturut-turut menggunakan heksan, etil asetat, dan air. Fraksi air diujikan aktivitas anti-QS terhadap Pseudomonas aeruginosa dengan metode difusi padat pada media Cetrimide Agar dengan kadar 0,0625 mg/ml; 0,125 mg/ml; 0,25 mg/ml; 0,50 mg/ml; 1,00 mg/mL; dan 2 mg/mL. Hasil positif ditunjukkan dengan penghambatan pembentukan pigmen hijau setelah diinkubasi 24 jam pada suhu 37oC. Fraksi air selanjutnya diuji mekanisme terkait quorum sensing yaitu antimotilitas, penghambatan pertumbuhan mikroba dan penghambatan biofilm, serta dilakukan karakterisasi senyawa menggunakan bioautografi dan skrining fitokimia. Fraksi air aktif sebagai anti-QS dimulai kadar 0,50 mg/mL dan aktivitasnya meningkat seiring peningkatan kadar. Uji motilitas menunjukkan bahwa fraksi air mempunyai aktivitas terbesar terhadap motilitas twitching. Fraksi air mampu menghambat pertumbuhan bakteri pada kadar MIC50 0,98 mg/mL dan mampu menghambat pembentukan biofilm pada kadar 2,00 mg/mL sebesar 52,34%. Analisis KLT sampel 1 mg/mL dengan fase diam RP-18 dan fase gerak metanol-kloroform-asam formiat (8:2:0,05 v/v) memberikan pemisahan pada hRf 57 dan 70 namun hasil negatif berdasarkan bioautografi. Bercak hRf 70 bereaksi positif setelah disemprot Anisaldehid-H2SO4 sehingga diperkirakan mengandung senyawa terpenoid. Hasil uji tabung menunjukkan keberadaan senyawa saponin dan tanin.

Antibiotic resistency nowadays has been a global issue leading to antibiotic drug discovery with new mechanism which one of it is by inhibiting microbial interaction known as Quorum Sensing Inhibition (QSi) especially natural product. Ant Plant Hydnophytum formicarum Jack. tuber ethanolic extract from Bintuni, West Papua, has been reported positive as anti-QS. The purpose of this research is to know the potency of water fraction from H. formicarum ethanolic extract against P.aeruginosa PAO1 pathogenicity which activity is influenced by QS. Ethanolic extract obtained from the previous research fractioned by liquid-liquid partition using n-hexane, ethyl acetate, and water. Anti-QS activity from water fraction is tested against P. aeruginosa by solid diffusion method in Cetrimide agar media with concentration 0,0625 mg/mL; 0,125 mg/mL; 0,50 mg/mL; 1,00 mg/mL; and 2,00 mg/mL. Positive result is shown as green pigment development inhibition after 24 hour incubation at 37oC. Water fraction later is tested its mechanism related to quorum sensing which are antimotility, microbial growth inhibition and biofilm inhibition, and compound characterization by bioautography and phytochemical screening are carried. Water fraction is active as anti-QS starting from concentration 0,50 mg/mL and its activity increases by concentration increasing. Motility test shows that water fraction has highest activity to twitching motility. Water fraction is able to inhibit bacterial growth at MIC50 concentration 0,98 mg/mL and inhibit biofilm development at concentration 2,00 mg/mL in 52,34%. TLC analysis of 1 mg/mL sample with RP-18 stationary phase and methanol-chloroform-formic acid (8:2:0,05 v/v) mobile phase gives separation at hRf 57 and 70, but negative result in bioautography. The spot of hRf 70 gives positive reaction after spraying with Anisaldehyde-H2SO4 ,so it is estimated contain terpenoid. Tube test result shows the presence of saponin and tannin.

Kata Kunci : sarang semut, quorum sensing, Pseudomonas aeruginosa PAO1, Hydnophytum formicarum Jack