PENGARUH SINERGISITAS KOMBINASI FRAKSI MENGANDUNG BRAZILEIN DARI KAYU SECANG (Caesalpinia sappan L.) DENGAN CISPLATIN PADA SEL KANKER PAYUDARA T47D TERHADAP EFEK SITOTOKSIK DAN INDUKSI APOPTOSIS IN VITRO

PRISNU TIRTANIRMALA, Prof. Dr. Edy Meiyanto, M.Si., Apt.

2014 | Skripsi | FARMASI

Kayu secang (Caesalpinia sappan L.) telah terbukti memiliki aktivitas antikanker terhadap berbagai macam sel kanker. Aktivitas antikanker tersebut didasarkan pada senyawa utama yang terkandung dalam kayu secang, yaitu brazilin dan brazilein. Brazilin, brazilein, dan kandungan senyawa secang lainnya seperti caesalpiniaphenol dapat mempengaruhi protein-protein yang berperan dalam apoptosis. Maka dari itu, diperlukan penelitian lebih lanjut mengenai potensi kayu secang sebagai agen kokemoterapi, salah satunya adalah agen kokemoterapi cisplatin pada kanker payudara. Penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas sitotoksik fraksi yang mengandung brazilein (FMB) secara tunggal maupun kombinasinya dengan agen kemoterapi cisplatin, serta kemampuan kombinasinya dalam menginduksi apoptosis pada sel kanker payudara T47D. Uji sitotoksisitas FMB dan cisplatin secara tunggal maupun kombinasinya dilakukan dengan MTT assay, sedangkan deteksi kemampuan induksi apoptosis dilakukan dengan metode flow cytometry menggunakan Annexin V-FITC dan propidium iodida. Hasil penelitian ditentukan dengan IC50 sebagai parameter sitotoksisitas FMB dan cisplatin secara tunggal, combination index (CI) sebagai parameter sinergisitas kombinasi, dan persentase populasi sel yang mengalami apoptosis sebagai parameter induksi apoptosis yang terjadi pada sel T47D. Pada uji sitotoksik tunggal, FMB memberikan efek sitotoksik terhadap sel T47D dengan nilai IC50 sebesar 68 μg/ml, sedangkan nilai IC50 cisplatin sebesar 16 μM dengan fenomena dose dependent manner. Dari hasil uji kombinasi FMB dengan cisplatin diperoleh kombinasi paling sinergis yaitu pada rasio konsentrasi 1/2 IC50 dengan nilai CI sebesar 0,66. Kombinasi FMB dengan cisplatin juga mampu menginduksi apoptosis populasi sel T47D 13% lebih besar dibandingkan dengan perlakuan tunggalnya. Oleh karena itu, FMB dari kayu secang bersifat sitotoksik terhadap sel T47D, serta mampu meningkatkan efek sitotoksik cisplatin dengan menginduksi apoptosis.

Secang heartwood (Caesalpinia sappan L.) has been shown to have anticancer activity against various cancer cells. The compounds that responsible to act as anticancer are brazilin and brazilein. Brazilin, brazilein, and other compounds such as caesalpiniaphenol can affect the proteins that play a role in apoptosis. Therefore, further research is needed to develop C. sappan as co-chemotherapeutic agent of cisplatin in breast cancer. This study aims to examine the cytotoxic activity of fraction containing brazilein (FCB) single or in combination with chemotherapeutic agent cisplatin, as well as the ability of the combination to induce apoptosis in T47D breast cancer cell lines. The cytotoxicity assay of FCB and cisplatin single or combination performed by MTT assay, whereas the detection ability of apoptosis induction was conducted by flow cytometry using Annexin V-FITC and propidium iodide. The results of the study was determined by IC50 as FCB and cisplatin cytotoxicity parameters, combination index (CI) as a synergy parameter combinations, and the percentage of cells undergoing apoptosis population as a parameter of apoptosis induction that occurs in T47D cells. In cytotoxic test, cytotoxic effect of FCB on T47D cells was showed by IC50 value of 68 μg/mL, whereas the IC50 value of cisplatin was 16 μM. From the combination assay, most synergistic combination of FCB and cisplatin is the 1/2 IC50 concentration ratio with CI value 0.66. The combination was also able to induce apoptosis on T47D. It was showed by cell population was 13% larger than the single treatment. Therefore, FCB has cytotoxic effect on T47D cells, and able to increase the cytotoxic effects of cisplatin to induce apoptosis.

Kata Kunci : Caesalpinia sappan L., cisplatin, apoptosis, kanker payudara