The Effect of Tempe Extract on Cytokines Production of J774.1 Cells and Pheritoneal Macrophage Cells (P-Mac) and Phagocytotic Activity of J774.1 cells

Auliya Qisthina Heryandari, Prof. Dr.Ir. Eni Harmayani, M.Sc.

2014 | Tesis | S2 Ilmu dan Teknologi Pangan

Lemahnya immunitas dapat menyebabkan penyakit infeksi. Akhirakhir ini, orang lebih memilih gaya hidup sehat dibandingkan mengkonsumsi obat-obatan untuk menjaga kesehatan. Immun sistem pada tubuh dapat ditingkatkan dengan mengkonsumsi makanan yang mengandung senyawa bernutrisi. Tempe merupakan produk fermentasi kedelai yang mengandung nilai nutrisi seperti vitamin, fitokemikal, antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh tempe yang diekstrak dengan air dan etanol terhadap produksi sitokin oleh sel makrofag J774.1 dan sel makrofag peritoneal dari tikus (P-mac), aktivitas fagositosis dari sel J774.1, serta meneliti mekanisme produksi sitokin oleh sel J774.1. Produksi sitokin dianalisa dengan menggunakan ELISA. Viabilitas sel dianalisa dengan menggunakan WST-8 kit. Aktifitas fagositosis dianalisa dengan mengukur fluoresen sel yang memfagositosis zymosan A yang dikonjugasikan dengan red texas. Inhibitor TLR-4 ditambahkan pada medium sel untuk mengetahui mekanisme produksi sitokin dan expresi P-JNK dianalisa dengan metode western blotting. Pengaruh perlakuan pemanasan dengan variasi suhu 600C, 800 C, 1000C dan perlakuan dengan enzim proteinase K dengan variasi konsentrasi 1μg/ml, 10μg/ml, 100μg/ml diuji untuk mengetahui karakteristik senyawa aktif pada tempe ekstrak. Tempe yang diekstrak dengan air dapat menstimulasi produksi TNF-α and IL-6 oleh sel J774.1 namun tempe yang diekstrak dengan etanol tidak dapat menstimulasi produksi sitokin. Tempe yang diekstrak dengan air dapat menstimulasi produksi TNF-α and IL-6 oleh sel primer peritoneal makrofag dari tikus. Penambahan inhibitor TLR-4 dapat menghambat produksi sitokin. Tempe yang diekstrak dengan air dapat menstimulasi fosforilasi ekspresi c-Jun N-terminal kinases (P-JNK) pada sel J774.1. Hal tersebut mengindikasikan bahwa stimulasi produksi sitokin oleh sel J774.1 melalui aktivasi P-JNK dan memalui TLR-4. Stimulasi produksi sitokin oleh tempe yang diekstrak dengan air tidak dipengaruhi oleh perlakuan pemanasan dan pemberian enzim proteinase K.

-

Kata Kunci : Tempe, TNF-α, IL-6, Phagocytotic Activity