KOMBINASI SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET DAN KALIBRASI MULTIVARIAT UNTUK ANALISIS METAMPIRON, VITAMIN B1, DAN VITAMIN B6 SECARA SIMULTAN TANPA PEMISAHAN

Chusnul Chotimah, Prof. Dr. Sudjadi, MS., Apt.

2014 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Penetapan kadar dua atau lebih zat aktif dalam sediaan farmasi pada umumnya dilakukan dengan metode kromatografi yang memerlukan waktu yang lama dan biaya yang besar, sehingga kurang cocok untuk pengujian rutin dalam kontrol kualitas sediaan obat. Dengan semakin banyaknya produk obat multikomponen yang beredar, menjadi tantangan untuk mengembangkan metode analisis yang cepat, sederhana, aman bagi analis dan harganya murah. Saat ini dengan berkembangnya perangkat lunak komputer dan analisis multivariat, maka metode spektrofotometri uv-vis banyak digunakan untuk analisis senyawa multikomponen secara simultan. Penelitian ini bertujuan untuk menetapkan kadar metampiron (MET), vitamin B1 (Vit B1) dan vitamin B6 (Vit B6) dalam sediaan multikomponen secara simultan tanpa pemisahan menggunakan metode spektrofotometri uv-kalibrasi multivariat partial least square (PLS). Penggunaan metode spektrofotometri uv-kalibrasi multivariat untuk analisis multikomponen dilakukan dalam tiga tahapan, yaitu kalibrasi, validasi dan penetapan kadar sampel. Evaluasi model kalibrasi dan validasi didasarkan pada nilai koefisien determinasi (R2), root mean square error of calibration (RMSEC), root mean square error of cross validation (RMSECV), root mean square error of prediction (RMSEP) dan predicted residual error sum of square (PRESS). Metode KCKT digunakan sebagai metode pembanding. Hasil penelitian menunjukkan bahwa spektrofotometri uv-kalibrasi multivariat PLS dapat digunakan untuk analisis kuantitatif obat multikomponen. Nilai R2 yang diperoleh > 0,99, yang menunjukkan akurasi yang baik. Nilai RMSEC, RMSECV, RMSEP dan PRESS yang diperoleh relatif rendah, yang menunjukkan presisi yang baik. Kadar MET, Vit B1 dan Vit B6 dalam sediaan tablet multikomponen yang diperoleh dengan metode spektrofotometri uv-PLS berturut-turut adalah 96,27 ± 0,38%; 100,48 ± 1,82% dan 98,45 ± 1,66%, sedangkan dengan metode KCKT diperoleh kadar 96,06 ± 0,76%, 99,35 ± 1,56% dan 98,96 ± 0,67%, masing-masing untuk MET, Vit B1 dan Vit B6 dihitung terhadap kdar yang tercantum pada etiket. Presisi dan akurasi kedua hasil uji dibandingkan secara statistik mengggunakan uji independent sample t-test dengan hasil bahwa presisi dan akurasi kedua metode tidak berbeda signifikan (P > 0,05). Dengan demikian, dapat disimpulkan bahwa metode spektrofotometri uv-kalibrasi multivariat dapat digunakan sebagai metode alternatif untuk penetapan kadar MET, Vit B1 dan Vit B6 dalam sediaan tablet secara simultan tanpa tahap pemisahan.

Generaly, analysis of two or more active substances is carried out using chromatographic tehniques, which need a long time and high costs, making it less suitable to be used in routine testing in quality control of drug. Due to the increasing number of multicomponent drug products, it is necessary to develop a quick, simple, safe and low cost analytical method. By the development of computer software and multivariate analysis, the uv-vis spectrophotometric method is widely used for the analysis of multicomponent compounds simultaneously. The aim of this study is to develop uv-vis spectrophotometry coupled with multivariate calibration of partial least square (PLS) for quantitative analysis of methampyron (MET), thiamin (Vit B1) and pyridoxin (vit B6) in the presence of cyanocobalamine without separation step. The study of uv-vis spectrophotometry in combination with multivariate calibration is conducted in three phases, namely the calibration, validation and samples assay. The evaluation of calibration model was based on the coefficient of determination (R2), root mean square error of calibration (RMSEC), root mean square error of cross validation (RMSECV), root mean square error of prediction (RMSEP) and the predicted residual sum of square (PRESS). The HPLC methods used for comparison method. The results showed that uv spectrophotometry combined with PLS multivariate calibration can be used for quantitative analysis of drugs. The coefficient of determination (R2) for the relationship between actual values and predicted values for all studied drugs was higher than 0,99 indicating good accuracy. The RMSEC, RMSECV, RMSEP and PRESS values obtained were relatively low indicating good precision. The level of MET, Vit B1 and Vit B6 obtained using UV spectrophotometry combination with PLS are 96.27 ± 0.38 %, 100.48 ± 1.82 % and 98.45 ± 1.66 % respectively, and those by HPLC are 96.06 ± 0.76 %, 99.35 ± 1.56 % and 98.96 ± 0.67 %, for MET, Vit B1 and Vit B6 respectively. The accuracy and presision results of developed method showed no significant difference compared to those obtained by HPLC. The developed method was succesfully used for analysis of methampyron, thiamin and pyridoxin in tablet dosage form.

Kata Kunci : multikomponen, spektrofotometri uv-vis, metampiron, vitamin B1, vitamin B6, partial least square