FORMULASI KULTUR MIKROBIA CAMPURAN (Paecilomyces lilacinus, Pseudozyma sp. dan Burkholderia sp.) DIPERKAYA DENGAN MOLASE DAN AKTIVITASNYA SEBAGAI INOKULAN UNTUK PENGENDALIAN NIMFA WERENG COKLAT (Nilaparvata lugens Stål)

STEWARD SEPTIAN, Prof. Dra. A. Endang S. Soetarto., M.Sc., Ph.D.

2014 | Skripsi | BIOLOGI

Berbagai teknik telah dilakukan untuk pengendalian wereng coklat (Nilaparvata lugens), baik secara biologi / kimiawi. Penelitian ini ditekankan untuk mendapatkan komposisi kultur mikrobia entomopatogen yang tepat dengan menggunakan media penyangga molase sebagai inokulum pengendalian wereng coklat secara biologi yang ramah lingkungan dengan menggunakan kultur campur mikrobia entomopatogen. Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh formulasi kultur campuran yang terdiri dari kapang (Paecilomyces lilacinus), khamir (Pseudozyma sp.) penghasil biosurfaktan, dan bakteri (Burkholderia sp.) yang efektif sebagai inokulum; mengukur tingkat efektivitas berdasarkan daya bunuh dengan media penyangga molase; pengaruh konsentrasi formula yang bervariasi terhadap kematian nimfa wereng coklat. Penelitian dimulai dengan purifikasi isolat. Kultur murni tersebut diuji kemampuan tumbuhnya pada masing – masing media cair dan dipantau secara spektrofotometri (A 660nm). Perbanyakan sel mikrobia dilakukan dengan percobaan kultivasi (500 ml media cair), diinkubasi pada suhu 250C selama 3 minggu. Setiap interval waktu tertentu, pertumbuhan diukur berdasarkan jumlah sel atau spora dengan Haemocytometer dan aktivitas kitinase dengan menggunakan metode DNS. Formulasi kultur campur dilakukan dengan menambah 20% molase sebagai medium penyangga. Efektivitas formulasi kultur campur dilakukan dengan volume formula yang bervariasi (20:80; 50:50; 80:20 dan 100 formula) terhadap wereng coklat. Hasil penelitian menunjukkan semua kultur murni mampu tumbuh pada medium cair dan jumlah spora kapang kurang dari 106 spora/ml selama 7 – 10 hari. Jumlah spora kapang meningkat setelah ditumbuhkan pada media gabah yang diberi penambahan ekstrak touge dan tepung jangkrik 5%. Setelah fase eksponensial akhir, P.lilacinus mampu menghasilkan spora mencapai 398 x 106 spora/ml, kerapatan sel Pseudozyma sp. 6,2 x 106 sel/ml, dan kerapatan sel Burkholderia sp. 87 x 106 sel/ml. Total sel konsorsia setelah formulasi berkisar 60 x 108 sel /ml. Kultur campuran yang diberi molase 20% sangat efektif membunuh nimfa wereng coklat yang ditunjukkan dengan kematian F1 mencapai 100% selama 2 minggu dengan aktivitas kitinase yaitu 20,38 unit/mL. Hasil analisis kematian wereng coklat berdasarkan LC95 adalah 72 %. Kesimpulan dari penelitian ini adalah kombinasi mikrobia entomopatogen dalam kultur campur atau konsorsia mikrobia terbukti efektif mengendalikan nimfa wereng coklat.

Various techniques (biological or chemical) have been applied to control brown planthopper (Nilaparvata lugens). This research focused on preparation of entomopathogenic microbial formulation using molasses (supporting medium) as inocula for brown planthopper nymphs control supposed to be enviromental friendly. The aim of this study was to obtain mixed cultures formulation that contains: Molds (Paecilomyces lilacinus), Biosurfactan producing Yeast (Pseudozyma sp.), and Chitinase producing Bacteria (Burkholderia sp.) used as inocula; to observed the effectiveness of mixed culture enriched by molasses as supporting medium based on lethal consentration to brown planthopper nymph. This study started with purifying isolates. Each pure culture was cultivated on it’s spesific liquid media, incubated for 24 – 48 hours. It’s growth was monitored spectrophotometrically (A 660nm). This culture was transfered on to (500 ml liquid media), incubated at 250C for 3 weeks in order to provide cell or spore number. Every interval time, microbial growth was observed microscopically based on the number of cells or spores using haemocytometer. The chitinase activity was detected using the DNS method. Formulation of mixed culture have been made with adition of 20 % molasses as supporting medium. Effectiveness of mixed culture formulation was meassured under different volume (20:80; 50:50; 80:20; and 100 formula) against brown planthopper nymph. The results revealed that all pure cultures were able to grow in liqiud medium and produced amount of spores ( > 106 spores / ml ) after 7 – 10 days incubation. Total number of mold spores increased significantly when it was cultivated on rice grain media enriched with bean sprouts extract dan 5 % crickets flour extract. At the end of exponential phase, P. lilacinus able to produce more spores around 398 x 106 spore/ml, Pseudozyma sp. cell reached 6,2 x 106 cell/ml, and the number of Burkholderia sp. cell reached 87 x 106 cell/ml. Mixed culture formulation containing around 60 x 108 cell/ml was used for biological control experiment upon brown planthopper nymph. These mixed culture enriched with molasses was very effective killing brown planthopper nymphs (100 % F1 mortality) for 2 weeks. The chitinase activity showed about 20,38 unit/ml. Based on LC95, brown planthopper nymphs mortality was 72 %. The conclusion of the research was combination of entomopathogenic microbial mixed culture proved effective for controlling brown planthopper nymph.

Kata Kunci : Nilaparvata lugens, Formulasi Kultur Campuran, Molase, Kitinase