ANALISIS MUTASI GENA PENYANDI CORE PROMOTER VIRUS HEPATITIS B PADA PENDONOR DARAH DENGAN INFEKSI HEPATITIS B TERSAMAR DI UNIT PELAYANAN TRANSFUSI DARAH RSUP Dr. SARDJITO

AGUNG PANJI WIDIYANTO, dr. Didik Setyo Heriyanto, Ph.D, Sp.PA

2013 | Skripsi | PENDIDIKAN DOKTER

Latar Belakang Infeksi hepatitis B masih menjadi masalah kesehatan global dengan tingkat morbiditas dan mortalitas yang tinggi. Indonesia sendiri tingkat endemisitas infeksi hepatitis B tergolong sedang sampai tinggi. Saat ini muncul infeksi hepatitis B tersamar yang ditandai dengan HBsAg negatif tetapi DNA VHB positif. Selain itu, rendahnya konsentrasi DNA VHB di bawah ambang batas alat uji juga dapat menyebabkan infeksi teramar ini. Beberapa penelitian sebelumnya menyatakan bahwa mutasi core promoter berhubungan dengan konsentrasi virus yang rendah. Tujuan Mengidentifikasi mutasi core promoter dan mengukur konsentrasi virus dengan mutasi core promoter. Metode Serum dipisah dari sampel darah dan diperiksa serologis HBsAg, anti-HBs, dan anti-HBc. Seluruh sampel kemudian diekstraksi dan diamplifikasi dengan PCR, lalu dibaca dengan elektroforesis. Sampel yang positif memiliki DNA VHB dilakukan sequencing dan konsentrasi virus diukur dengan RT-PCR kuantitatif. Hasil Dari 150 sampel HBsAg negatif terdapat anti-HBs positif 21,3%, dan anti-HBc positif 33,3%. Hasil dari elektroforesis dan sequencing adalah terdapat DNA VHB positif sebanyak 18 sampel (12%), dimana sebanyak 7 sampel (38,9%) terdapat mutasi core promoter. Mutasi core promoter berada pada A1762T/G1764A sebanyak 5 sampel (71,4%) dan T1753C sebanyak 2 sampel (28,6%). Rerata konsentrasi virus dengan mutasi core promoter yang dapat terdeteksi 2,2 log copies. Nilai ini tergolong rendah dibawah 2,5 log copies dan beberapa sampel tidak dapat terdeteksi konsentrasi virusnya kare berada di bawah ambang batas alat uji 1,8 log copies. Kesimpulan Terdapat mutasi gena penyandi core promoter dengan letak mutasi A1762T/G1764A dan T1753C dengan rerata konsentrasi virus yang terdeteksi 2,2 log copies.

BackgroundHepatitis B infection still becomes a global medical problem with high morbidity and mortality levels. Indonesia itself has medium to high endemicity level. Nowadays the occult hepatitis B infection appears which is marked by negative HBsAg but positive DNA VHB. On the other hand, low concentration of DNA VHB under cut-off point can also imply this occult infection. Some previous results show that core promoter mutation is connected with low virus concentration. ObjectiveIdentifying core promoter mutation and measuring virus concentration that has core promoter mutation. MethodSerum is separated from blood sample and tested with HBsAg, anti-HBs, and anti-HBc. All samples are extracted and amplified by PCR, then read by using electroforesis. We perform sequencing to the sample that positively has DNA VHB and virus concentration is measured by quantitative RT-PCR. ResultFrom 150 negative HBsAg samples there is positive anti-HBs 21,3%, and positive anti-HBc 33,3%. The result of electroforesis and sequencing is that there exists 18 samples of positive DNA VHB (12%), where there is core promoter mutation in 7 samples (38,9%). There is core promoter mutation in 5 samples of A1762T / G1764A (71,4%) and 2 samples of T1753C (28,6%). The average concentration of virus with core promoter mutation that can be detected is 2,2 log copies. This value is considered as low (under 2,5 log copies) and the virus concentration of some samples cannot be detected because it is under cut-off point 1,8 log copies. ConclusionThere iscore promoter gene mutation where its mutation is located at A1762T / G1764A and T1753C where the average of detected virus concentration is 2,2 log copies.

Kata Kunci : Mutasi, core promoter, infeksi hepatitis B, pendonor darah.