PENGARUH PENAMBAHAN METIL JASMONAT PADA KULTUR KALUS DAUN SELASIH (Ocimum basilicum L. forma violaceum Back.) SERTA UJI BIOAUTOGRAFI TERHADAP Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus

IRMA PUSPITA DEWI, Djoko Santosa, S.Si., M.Si.

2014 | Skripsi | FARMASI

Selasih (Ocimum basilicum L. forma violaceum Back.) dapat tumbuh di daerah subtropis hingga tropis, termasuk Indonesia. Persebaran yang luas menyebabkan perbedaan senyawa yang terkandung di dalamnya. Maka perlu dilakukan teknik budidaya in vitro dengan kultur kalus dan induksi pembentukan metabolit sekundernya menggunakan elisitor. Berdasarkan uraian tersebut, diperlukan penelitian untuk mengetahui pengaruh metil jasmonat (MeJA) dan aktivitas antibakterinya terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus secara bioautografi. Daun selasih steril ditanam pada media Murashige-Skoog padat dengan 2,4-D 1 ppm. Kalus usia 3 minggu subkultur dipindahkan pada media MS cair dengan 2,4-D 0,1 ppm kontrol dan perlakuan MeJA (10 mM, 20 mM dan 30 mM) selama 3 hari. Kalus diukur parameter pertumbuhannya melalui peningkatan bobot basah, bobot kering dan susut pengeringan. Pengamatan sel dilakukan untuk mengetahui pengaruh MeJA terhadap kalus secara seluler. Pengaruh penambahan MeJA dianalisis melalui Kromatografi Lapis Tipis (KLT) secara kualitatif. Uji bioautografi dilakukan untuk mengetahui senyawa yang bertanggunjawab terhadap aktivitas antibakteri. Kalus kontrol memiliki persentase bobot kering paling tinggi, kemudian semakin menurun seiring peningkatan konsentrasi MeJA. Pengamatan sel kalus menunjukkan bahwa MeJA dapat mempengaruhi proses mitosis sel dengan respon yang beragam dan menghambat sitokinesis sel. Analisis KLT kalus kontrol menunjukkan kemiripan dengan profil KLT tanaman asal. Beberapa senyawa tidak terbentuk pada kalus perlakuan diduga akibat penghambatan oleh MeJA. Berdasarkan bioautografi, ekstrak etanol kalus kontrol memiliki aktivitas antibakteri terhadap E. coli dan S. aureus dengan perkiraan senyawa yang bertanggungjawab merupakan golongan terpenoid.

Basil (Ocimum basilicum L. forma violaceum Back) can be grown in subtropical to tropical regions, including Indonesia. Wide spread of the discrepancies compounds contained therein. It is necessary to in vitro cultivation techniques with callus formation and induction of secondary metabolites using elicitor. Based on these descriptions, research is needed to determine the effect of methyl jasmonate (MeJA) and antibacterial activity against Escherichia coli and Staphylococcus aureus in bioautography. Sterilized basil leaves grown on sterile Murashige-Skoog solid medium with 1 ppm 2,4-D. 3 weeks old callus subculture was transferred to liquid MS medium with 2,4 -D 0.1 ppm control and treatment MeJA (10 mM, 20 mM and 30 mM) for 3 days. Callus growth parameters measured by the increase in wet weight, dry weight and drying shrinkage. The observation cell was conducted to determine the effect of the callus cell in the MeJA. Effect of the addition of MeJA analyzed by Thin Layer Chromatography (TLC) qualitatively. Bioautography test is performed to determine which compound is responsible to the antibacterial activity. Callus control has the highest percentage of dry weight, then progressively decrease with increased concentrations of MeJA. Observations showed that the MeJA in culture can affect the process of mitotic cells with diverse responses and inhibits cell cytokinesis. TLC analysis showed similarities to control callus TLC profile of plant origin. Some compounds are not formed on the callus treatment allegedly caused by the inhibition of the MeJA. Based on bioautography test, ethanol extract of control callus has antibacterial activity against E. coli and S. aureus with estimates of a class of compounds that are responsible is terpenoids.

Kata Kunci : selasih, Ocimum basilicum L. forma violaceum Back., kultur kalus, metil jasmonat, bioautografi.