IDENTIFIKASI SENYAWA DALAM FRAKSI AKTIF EKSTRAK RUMPUT LAUT COKLAT Sargassum hystrix SEBAGAI INHIBITOR ENZIM -GLUKOSIDASE

LIS FITRAMADAN, Respati Tri Swasono, S.Si., M.Phil., Ph.D.

2013 | Tesis | S2 Ilmu Kimia

Penelitian ini bertujuan menguji aktivitas fraksi sebagai inhibitor enzim -glukosidase dan mengidentifikasi senyawa fraksi aktif dari ekstrak Sargassum hystrix. Tahapan kerja meliputi pengambilan sampel, identifikasi rumput laut, ekstraksi, pemisahan dengan kromatografi kolom, identifikasi dengan Liquid Chromatography–Electrospray Ionization Mass Spectrometry (LC-ESIMS) serta uji aktivitas. Diperoleh berat fraksi I, II dan III masing-masing 0,03%, 0,05%, dan 0,03%. Identifikasi menggunakan ESI-MS menunjukkan bahwa senyawa loliolida terdapat dalam fraksi I dan II. Fraksi I juga mengandung furanon terhalogenasi sedangkan fraksi III mengandung 4,4’-dihidroksibifenil. Pengujian aktivitas dari setiap fraksi dilakukan secara in vitro menggunakan enzim -glukosidase dan substrat p-nitrofenil- -D-glukopiranosida. Hasil reaksi diukur serapannya dengan menggunakan Elisa microplate reader pada panjang gelombang 405 nm. Pada konsentrasi 40 μg/mL, fraksi I, II dan III mampu menghambat aktivitas enzim -glukosidase masing-masing sebesar 89,8%, 95,0%, dan 96,1%. Nilai IC50 fraksi I, II dan III masing-masing sebesar 8,9, 6,3, dan 7,6 μg/mL. Sementara nilai IC50 obat antidiabetes akarbose hanya sebesar 2,1 mg/mL. Uji statistik one way-ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% dilakukan untuk membedakan nilai IC50 antar setiap fraksi serta fraksi terhadap akarbose, dengan hasil berbeda secara signifikan (P<0,05).

This research aims to identify the compounds of the active fractions from the brown seaweed Sargassum hystrix extract as -glucosidase enzyme inhibitor. The study includes sampling, identification of the seaweed, extraction, separation by column chromatography, identification by Liquid Chromatography-Electrospray Ionization Mass Spectrometry (LC-ESIMS) and activity test. The weight of fractions I, II and III are 0.03%, 0.05%, and 0.03%, respectively. Identification by ESI-MS fractions I and II showed the precent of loliolide. Fraction I also contained halogenated furanone, whereas fraction III 4,4’-dihydroxybiphenyl compound. The activity test of each fractions carried out in vitro using -glucosidase enzyme and the substrate of p-nitrophenyl- -D-glucopiranoside. The product of reaction was measured its absorbance using the Elisa microplate reader at 405 nm. At the concentration of 40 μg/mL, fraksi I, II and III inhibits the -glucosidase enzyme activity by 89.8%, 95.0%, and 96.1%, respectively. IC50 values of fractions I, II and III, were 8.9, 6.3, and 7.6 μg/mL, respectively. While IC50 value of an antidiabetic drugs of akarbose was only 2.1 mg/mL. Statistical tests-one way ANOVA with 95% confidence level was carried out to distinguish between the IC50 values of each fraction and fraction against of acarbose, with the results differ significantly (P < 0.05).

Kata Kunci : Sargassum hystrix, Metabolit Sekunder , Inhibitor -glukosidase