Respon Inflamasi dan Ekspresi Matriks Metalloproteinase-8 pada Pulpa Gigi Setelah Aplikasi Bahan Etsa Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 19% dan Asam Fosfat 37% (kajian in vivo pada gigi molar tikus Spague Dawley)

NADIE FATIMATUZZAHRO, drg. Tetiana Haniastuti, M.Kes, Ph.D.

2013 | Tesis | S2 Kedokteran Gigi

Penggunaan bahan etsa seperti ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA) dan asam fosfat pada sistem restorasi adhesif bertujuan untuk meningkatkan retensi bagi bahan restorasi, dapat menginduksi inflamasi pada pulpa. Inflamasi merupakan respon tubuh melawan infeksi, untuk memperbaiki jaringan yang rusak. Matriks metalloproteinase-8 (MMP-8) merupakan enzim kolagenolitik yang mampu mendegradasi kolagen tipe 1. Pada kondisi normal terdapat ekspresi MMP-8 dalam kadar rendah dan meningkat pada proses inflamasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek EDTA 19% dan asam fosfat 37% sebagai bahan etsa terhadap respon inflamasi dan ekspresi MMP-8 pada pulpa gigi. Empat puluh delapan ekor tikus Sprague Dawley jantan digunakan dalam penelitian ini. Gigi molar satu rahang atas dipreparasi pada permukaan oklusal menggunakan diamond round bur. Hewan coba dibagi menjadi 3 kelompok. EDTA 19%, asam fosfat 37% dan akuades diaplikasikan pada kavitas kelompok I, II dan III, dikeringkan dengan cotton pellet dan ditumpat semen ionomer kaca. Dekapitasi hewan coba dilakukan pada hari ke-1, 3, 5, 7 dan 14 setelah perlakuan (n=3). Spesimen didekalsifikasi menggunakan EDTA 10%, ditanam pada parafin dan dipotong serial. Pengecatan hematoksilin eosin dilakukan untuk mengetahui respon inflamasi. Imunohistokimia dilakukan dengan rabbit anti rat MMP-8 polyclonal antibody untuk melihat ekspresi MMP-8. Hasil Anava menunjukkan perbedaan yang bermakna jumlah sel inflamasi antar kelompok perlakuan (F=15,26), yang mengindikasikan bahwa aplikasi bahan etsa menyebabkan infiltrasi sel inflamasi. Hasil uji Tukey HSD menunjukkan bahwa asam fosfat 37% menyebabkan infiltrasi sel inflamasi signifikan (p<0,05) lebih banyak dibanding EDTA 19% (mean difference=1,333). Aplikasi asam fosfat 37% menunjukkan ekspresi MMP-8 yang lebih kuat dibanding EDTA 19% pada hari ke-1 dan 7 setelah perlakuan. Kesimpulan dari penelitian ini bahwa asam fosfat 37% menyebabkan infiltrasi sel inflamasi yang lebih banyak dan ekspresi MMP-8 yang lebih kuat dibanding EDTA 19%. Meskipun aplikasi EDTA 19% dan asam fosfat 37% menyebabkan inflamasi, namun kondisi pulpa tampak normal pada hari ke-14 setelah perlakuan.

Etching agents such as ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA) and phosphoric acid which are widely used in adhesive restoration system aimed to increase retention of restorative materials; however, these agents may induce inflammation of dental pulp. Inflammation is a body response against infectious agents. Matrix metalloproteinase-8, the major collagenolytic enzyme, degrades collagen type 1. This enzyme is expressed in low level in normal condition, however, the expression will increase during inflammation. The purpose of the present research was to study the effect of 19% EDTA and 37% phosphoric acid application as an etching agents on the inflammatory response and MMP-8 expression of dental pulp. Forty-eight male Sprague Dawley rats were used in this study. Cavity preparation was made on the occlusal surface of maxillary first molar using a round diamond bur. The rats were divided into 3 groups. 19% EDTA, 37% phosphoric acid, and distilled water were applied on the surface of the cavity of the teeth in group I, II, and III subsequently. Cavities were dried with a cotton pellet and then filled with glass ionomer cement. The rats were sacrified at 1, 3, 5, 7, and 14 days after the treatment (n=3 for each day). The specimens were decalcified using 10% EDTA, embedded in paraffin, and sectioned serially. The sections were stained with hematoxylin eosin to examine the inflammatory response. Immunohistochemistry was performed using rabbit anti rat MMP-8 polyclonal antibody to examine MMP-8 expression. Anova showed a significant difference among treatment groups (F=15.26), indicating that etching agents application induced inflammatory cells infiltration in dental pulp. Tuckey HSD test showed that application of 37% phosphoric acid increased higher number of inflammatory cells significantly (p<0.05) than 19% EDTA (mean difference=1.333). 37% phosphoric acid application stimulated stronger MMP-8 expression than 19% EDTA on 1 and 7 days after the treatment. In conclusion, 37% phosphoric acid induced higher number of the inflammatory cells and stronger expression of MMP-8 than 19% EDTA. Although application of 19% EDTA and 37% phosphoric acid as an etching agents induced inflammation, the pulp showed normal condition on 14 days after the application.

Kata Kunci : EDTA 19%, asam fosfat 37%, MMP-8, inflamasi, pulpa; 19% EDTA, 37% phosphoric acid, MMP-8, inflammation, dental pulp