ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIBAKTERI DAUN Garcinia dulcis (Roxb.)Kurz.

HADY ANSHORY T, Prof. Dr. Subagus Wahyuono, M.Sc., Apt

2013 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Penyakit infeksi bakteri merupakan kasus penyakit dengan tingkat kejadian yang tinggi. Di sisi lain resistensi bakteri penyebab penyakit infeksi terhadap antibiotika semakin meluas, sehingga penelitian untuk mencari agen antiinfeksi baru perlu dilakukan. Garcinia dulcis (Roxb.) Kurz. merupakan salah satu tanaman obat yang dilaporkan mengandung senyawa antibakteri pada bunga, buah, biji, dan kulit akarnya. Namun senyawa antibakteri dari daun G. dulcis belum pernah dilaporkan, oleh karena itu penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi senyawa antibakteri dari daun G.dulcis serta mengetahui potensi antibakteri dan struktur kimianya. Isolasi senyawa antibakteri dari daun G.dulcis dilakukan dengan pendekatan aktivitas biologi (Bioassay guided). Hasil pemisahan pada setiap langkah isolasi diuji aktivitas antibakterinya dengan metode difusi terhadap bakteri S.aureus. Ekstraksi daun G.dulcis dilakukan dengan metode maserasi bertingkat menggunakan pelarut washbenzen dan dilanjutkan dengan metanol. Pemisahan ekstrak washbenzen dilakukan dengan teknik partisi cair-cair (n-heksan:etanol 70%). Fraksi lapisan bawah (fraksi etanol) difraksinasi lebih lanjut menggunakan kromatografi vakum cair dengan campuran pelarut n-heksan dan etil asetat dengan berbagai perbandingan. Fraksi aktif antibakteri dipisahkan dengan kromatografi lapis tipis preparatif menggunakan eluen n-heksan:aseton (4:1). Uji kemurnian isolat dilakukan dengan KLT multi-sistem eluen dan KLT dua dimensi. Kadar Hambat Minimal (KHM) isolat diuji dengan metode mikrodilusi terhadap bakteri S. aureus, S. epidermidis, S. mutans, E. coli, dan Bacillus spp. Identifikasi struktur kimia dilakukan dengan metode spekroskopi (UV, IR, GC-MS, dan 1H-NMR). Senyawa isolat daun G. dulcis memiliki potensi antibakteri yang tinggi terhadap bakteri S. aureus, S. muttan, dan Bacillus spp dengan KHM /KBM sebesar 78,13 μg/ml, sedangkan potensinya terhadap bakteri S. epidermidis lebih rendah dengan nilai KHM dan KBM sebesar 312,5 dan 625 μg/ml , serta terhadap E. coli paling rendah dengan KHM dan KBM berturut-turut sebesar 1250 dan 2500 μg/ml. Berdasarkan data spektra UV, IR, MS, dan 1H-NMR disimpulkan bahwa isolat merupakan senyawa golongan terpenoid dengan karakteristik gugus fungsi CH3 (metil), CH2 (metilen), COOH (karboksilat), dan C6H5 (cincin benzen).

Bacterial infection is a disease with a high incidence. On the other side, bacterial resistance to antibiotics are rising, so is needed to find a new anti-infective agents. Garcinia dulcis (Roxb.) Kurz. is one of the medicinal plants are reported to contain antibacterial compounds in flowers, fruits, seeds, bark and roots. However, an antibacterial compound from the leaves has not been reported, therefore this study aimed to isolate the antibacterial compounds from the G.dulcis leaves and determine antibacterial activity and chemical structure description. Method of Isolation of antibacterial compound from the G. dulcis leaves was directed by bioassay against Staphylococcus aureus. Extraction was done by maceration method using washbenzen and continued with methanol solvents. Washbenzen extracts were then separated by liquid-liquid partition technique (n-hexane: ethanol 70%). The bottom layer fractions (ethanolic fraction) were separated using vacuum liquid chromatography with a mixture solvent of n-hexane and ethyl acetate with various comparisons. The fraction with the highest antibacterial activity were separated by preparative thin layer chromatography using n-hexane : acetone (4:1 v/v). Purity test of the isolate was performed by multi-system eluent and two-dimensional TLC. Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and MBC of isolates were tested by the microdilution method against S. aureus, S. epidermidis, S. mutans, E. coli, and Bacillus spp bacteria. Identification of the isolat’s chemical structure was conducted by spectroscopy method (UV, IR, GC-MS, and 1H-NMR). Garcinia dulcis leaves isolates has a high antibacterial activity against S. aureus, S. mutans, and Bacillus spp bacteria with MIC/MBC value of to 78.13 g/ml, while the antibacterial activity against S. epidermidis was lower with MIC and MBC values of 312.5 and 625 g/ml. The lowest activity was found against E. coli bacteria with MIC and MBC values of 1250 and 2500 g/ml, respectively. Based on spectral data UV, IR, MS, and 1H-NMR suggested that the chemical structures of the isolates were terpenoid group.

Kata Kunci : Garcinia dulcis, terpenoid, antibakteri, isolasi