IDENTIFIKASI GOLONGAN SENYAWA TOKSIK DARI EKSTRAK METANOLIK DAUN Piper spp.TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D

Rohmat Priya Atmaja, Dr. L. Hartanto Nugroho, M.Agr.

2013 | Tesis | S2 Biologi

Beberapa spesies Piper diketahui dapat menghambat pertumbuhan sel kanker. Hambatan pertumbuhan sel kanker pada Piper spp. disebabkan karena kandungan senyawa metabolit sekunder. Senyawa Cis-yagonin dan flavokavain B yang diisolasi dari ekstrak metanol P. methysticum, memiliki aktivitas sitotoksik terhadap sel kanker leukemia dan ovarium. Ekstrak etanol P. crocatum yang mengandung golongan senyawa alkaloid, saponin, tanin, dan flavonoid diketahui mampu menghambat pertumbuhan sel kanker T47D. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jenis Piper yang memiliki kemampuan paling tinggi dalam menghambat pertumbuhan sel kanker T47D secara in vitro dan mengidentifikasi golongan senyawa yang mampu menghambat pertumbuhan sel kanker T47D. Sampel penelitian berasal dari daun 10 spesies dari genus Piper yang diambil dari Kebun Raya Bogor. Ekstraksi dilakukan secara sokhletasi dengan menggunakan pelarut metanol. Metode pemisahan komponen senyawa dalam ekstrak menggunakan vacuum liquid Chromatography (VLC) dan kromatografi lapis tipis preparatif (KLTP). Uji sitotoksistas ekstrak, fraksi gabungan VLC, dan isolat KLTP dilakukan pada sel kanker T47D dengan metode MTT assay. Identifikasi senyawa secara umum menggunakan pereaksi semprot. Berdasarkan uji sitotoksisitas ekstrak metanolik hasil soxhletasi daun Piper spp., diketahui bahwa aktivitas sitotoksik ekstrak 10 spesies Piper masing-masing memiliki nilai yang berbeda. Di antara 10 spesies tersebut, P. porphyrophyllum memiliki aktivitas sitotoksik yang tertinggi (IC50= 667,5 μg/ml) jika dibandingkan dengan 9 spesies yang lain. Aktivitas sitotoksik dari ekstrak P. porphyrophyllum menunjukkan aktivitas sitotoksik yang lebih rendah jika dibadingkan dengan aktivitas sitotoksik ekstrak dan obat kanker doxorubicin (IC50 fraksi VLC= 1.389,14 μg/ml; IC50 isolat KLTP= 1.137,68 μg/ml; IC50 doxorubicin= 7,6 μg/ml). Golongan senyawa aktif yang teridentifikasi dalam isolat hasil KLTP dengan aktivitas sitotoksik tertinggi antara lain flavonoid, triterpenoid, dan alkaloid.

Several species of Piper spp. has know for cytotoxic activities. The activity come from compounds that belong to secondary metabolite. Cis-yagonin and flavokavain B compounds isolated from P. methysticum are having cytotoxic activities to leukemia and ovary cancer cell. The ethanolic extract of P. crocatum has cytotoxic activity to breast cancer T47D cell line. The metabolites content from ethanolic extract P. crocatum are alkaloids, saponin, tannin, and flavonoids. The purposes of the research to analyses cytotoxic activity of Piper spp. and the compound class which has cytotoxic property are identified. Soxhletation method with methanol as a solvent was selected for the extraction procedure. The leaves from 10 species of Piper spp. were collected from Bogor Botanical Garden. MTT assay was used for cytotoxic assay to cell line T47D. The component from the extract which had a highest cytotoxicity, was separated by vacuum liquid chromatography (VLC). The fractions from the VLC with highest cytotoxic activity was separated by preparative thin layer chromatography (PTLC). TLC was selected to monitor the constituent from the whole extract, fraction from VLC and PTLC. The compounds class from part of PTLC with highest cytotoxic activity are determinated by spray reagents. The highest cytotoxic activity came from P. porphyrophyllum extract (IC50= 667,5 μg/ml). Cytotoxic activity from the constituent of the whole extract P. porphyrophyllum less active than the whole extract and doxorubicin (IC50 VLC fraction= 1.389,14 μg/ml; IC50 part of PTLC fraction= 1.137,68 μg/ml; IC50 doxorubicin= 7,6 μg/ml). Cytotoxic activity to T47D cell line base on the IC50 values of crude extract, fraction of VLC, and part of PTLC P. porphyrophyllum have a weak activities. The compound classes identified in the PTLC were flavonoid, triterpenes, and alkaloids.

Kata Kunci : Piper spp., sitotoksisitas, T47D