PENGARUH APLIKASI MEMBRAN CARBONATED HYDROXYAPATITE (CHA) - GELATIN / KITOSAN TERHADAP PROLIFERASI FIBROBLAS (Kajian In Vitro)

FITRI WIJAYANTI, drg. Anne Handrini Dewi, M.Kes.

2013 | Skripsi | PENDIDIKAN DOKTER GIGI

Tubuh memiliki mekanisme alami dalam memperbaiki jaringan yang rusak akibat trauma maupun kelainan yang disebut regenerasi jaringan. Salah satu fase penting dalam regenerasi jaringan yaitu proliferasi fibroblas. Fibroblas berperan pada proses sintesis, deposisi, dan remodelling jaringan ikat. Perancah berbahan dasar Carbonated Hydroxyapatite (CHA) pada beberapa hasil penelitian dilaporkan memiliki biokompatibilitas yang baik, osteokonduktivitas dan dapat meningkatkan konsentrasi lokal ion kalsium dan fosfat yang dibutuhkan untuk regenerasi jaringan tulang. Sifat mekanik CHA perlu ditingkatkan terkait karakteristik bahan yang sulit mengisi area defek tulang karena dapat bermigrasi ke jaringan sekitar. Hal tersebut dicegah dengan menggabungkan serbuk CHA dengan polimer alam seperti gelatin dan kitosan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh aplikasi membran CHA-gelatin/kitosan terhadap proliferasi fibroblas (in vitro). Subjek penelitian ini adalah sel fibroblas vero dengan konsentrasi 2x10 4 sel/ml. Sel fibroblas vero dibagi menjadi tiga kelompok yaitu kelompok pertama sel fibroblas vero tanpa aplikasi membran (kontrol). Kelompok perlakuan dibagi menjadi sel fibroblas vero dengan aplikasi membran CHA-gelatin dan sel fibroblas vero dengan membran CHA-gelatin/kitosan. Nilai absorbansi atau Optical Density (OD) proliferasi fibroblas dibaca dengan menggunakan ELISA reader 550nm. Proliferasi fibroblas diamati pada jam ke-12, 24, 48, dan 72 (n=3). Hasil uji ANOVA dua arah menunjukkan bahwa aplikasi membran CHAgelatin/ kitosan dan lama waktu perlakuan mempengaruhi proliferasi fibroblas. Proliferasi fibroblas pada kelompok membran CHA-gelatin/kitosan lebih tinggi dibandingkan pada kelompok kontrol dan membran CHA-gelatin di semua subkelompok jam. Pengamatan jam ke-72 menunjukkan terjadi peningkatan proliferasi fibroblas yang bermakna pada kelompok membran CHA-gelatin dan kelompok CHA-gelatin/kitosan. Kesimpulannya, bahwa aplikasi membran CHAgelatin/ kitosan dapat meningkatkan proliferasi fibroblas.

The body have a natural mechanism to repair the tissue damage caused of trauma or abnormalities. In the tissue regeneration, one of importance phase is fibroblast proliferation. It play a role in the process of synthesis, deposition and connective tissue remodelling. In previous study, the scaffold-based Carbonated Hydroxyapatite (CHA) was reported have a good biocompatibility, osteoconductivity and it could increased the local concentration of calcium and phosphate ions that was needed for new bone regeneration. The CHA mechanical properties should be improved related to material characteristic due its difficult clinical handling to take the powder particles to fill in bone defect without any disperse or migrate in other site. The solution of this case is to combine CHA powder with natural polymer such gelatin and chitosan. The aim of this study was to investigate the effect of the applications CHA-gelatin/chitosan membrane of fibroblast proliferation (in vitro). The subjects of this study were vero cell fibroblasts with concentration of 2x10 4 cells/ml. Vero cell fibroblasts were devided into 3 groups. The first group just for vero cell fibroblasts without membrane application (control group). The treatment groups were devided to CHA-gelatin membrane and CHAgelatin/ chitosan membrane application. Absorbance values or Optical Densuty (OD) of fibroblast proliferation was read using ELISA reader at 550nm after 12, 24, 48, and 72 hours time of observation (n=3). statistical analysis Two-way ANOVA showed that the application of CHAgelatin/ chitosan membrane and treatment duration influenced the fibroblast proliferation. Fibroblast proliferation in CHA-gelatin/chitosan membrane group was the highest than any other treatment groups in each subdivided time. At the 72 hours time observation, the result showed that there were significant increase fibroblast proliferation on CHA-gelatin/chitosan membrane group and CHAgelatin membrane group. In conclusion, the application of CHA-gelatin/chitosan membrane could increased the fibroblast proliferation.

Kata Kunci : regenerasi, membran CHA-gelatin/kitosan, proliferasi fibroblas