EVALUASI KLINIS DAN PATOLOGIS INFEKSI Microsporum canis PADA ANJING DENGAN TERAPI KETOKONAZOLE, GRISEOFULVIN, DAN KOMBINASI KEDUANYA

PUTU AYU SISYAWATI PUTRININGSIH, Dr. drh. Soedarmanto Indarjulianto

2013 | Tesis | S2 Sain Veteriner

Dermatofitosis adalah penyakit kulit infeksius dan berpotensi zoonosis yang disebabkan oleh jamur dermatofita. Penyakit ini banyak dijumpai pada anjing, tetapi diagnosis sulit ditegakkan secara klinis karena bervariasinya gejala klinis penderita dermatitis, sehingga terapinya kurang efektif. Penelitian ini bertujuan melakukan evaluasi gambaran klinis dan patologis anjing yang diinfeksi Microsporum canis, serta evaluasi terhadap efikasi terapi antifungal. Sebanyak 12 ekor anjing dibagi menjadi 4 kelompok. Kelompok I diterapi ketokonazole krim 2% yang diberikan 2 kali sehari (pada flank kanan) dan sebagai kontrol negatif (tidak diinfeksi dan tidak diterapi pada flank kiri), kelompok II diterapi griseofulvin oral dengan dosis 20 mg/kg BB yang diberikan 1 kali sehari, kelompok III diterapi kombinasi ketokonazole 2% dan griseofulvin 20 mg/kg BB, kelompok IV tidak diterapi (kelompok kontrol positif). Anjing kelompok I sampai IV diinfeksi dengan suspensi M. canis sejumlah 36x105 sel/mL. Infeksi dilakukan dengan meneteskan suspensi sebanyak 20 μL pada kulit di flank kanan. Perkembangan lesi diamati sampai dengan hari ke-14. Perlakuan dengan antifungal dimulai dari hari ke-14 pasca infeksi, diberikan setiap hari selama 21 hari. Perkembangan lesi klinis dan patologis selama infeksi dan terapi diamati dengan lampu Wood’s, pemeriksaan klinis, dan biopsi jaringan kulit untuk pemeriksaan histopatologis. Konfirmasi terhadap jamur penginfeksi dilakukan dengan mengambil kerokan kulit dan rambut kemudian dipupuk pada media Sabaroud Dextrose Agar (SDA). Pewarnaan Hematoksilin-Eosin dan imunohistokimia dengan antibodi anti-CD68 dan anti-CD45 dilakukan untuk melihat perubahan jaringan pada epidermis, dermis dan petanda makrofag serta limfosit. Hasil pengamatan lesi klinis dan patologis dianalisis secara deskriptif, sedangkan efikasi terapi dianalisis secara deskriptif dan statistik menggunakan one way ANOVA dan uji lanjut Tukey’s test terhadap ketebalan epidermis dan jumlah sel makrofag serta limfosit yang mengekspresikan protein CD68 dan CD45. Hasil pengamatan terhadap lesi klinis pada kulit yang diinfeksi M. canis didapatkan adanya eritema, scale, krusta, alopesia sirkuler, dan hiperpigmentasi. Gambaran histopatologis yang ditemukan berupa hiperplasia epidermis, parakeratosis, radang pada dermis, adanya krusta dan potongan hifa, serta peningkatan jumlah sel radang yang mengekspresikan protein CD68 dan CD45. Penurunan derajat keparahan lesi baik klinis maupun histopatologis terlihat pada semua anjing setelah diterapi tunggal maupun kombinasi. Secara statistik, terdapat efek terapi terhadap penurunan bermakna tebal epidermis (p < 0,05) pada kelompok terapi kombinasi dibandingkan dengan kelompok terapi tunggal griseofulvin (tetapi bukan terapi ketokonazole, p > 0,05) dan kontrol. Hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa terapi kombinasi ketokonazole topikal dan griseofulvin sistemik memberikan efek yang lebih baik dibandingkan terapi tunggal terhadap gambaran klinis dan patologis infeksi M. canis pada anjing.

Dermatophytosis is an infectious skin disease and potentially zoonotic caused by dermatophytes. The disease is often found in dogs. The clinical diagnosis of dermatophytosis is difficult to determine because the clinical symptoms of dermatitis is varied, however. Moreover, the above clinical diagnosis problem results in uneffective antifungal treatment in patients. This study aimed to evaluate the clinical and pathological features of dog’s skin which is infected with Microsporum canis, as well as to evaluate the efficacy of antifungal therapy. Twelve female and male dogs with the aged of 12 weeks were divided into 4 groups of 3. Group I treated with 2% ketoconazole cream that given 2 times a day (on the right flank) and as a negative control that is not infected and not treated on the left flank. Group II treated orally with 20 mg/kg BW griseofulvin once a day. Group III treated with a combination of both, and group IV untreated (positive control group). All groups were infected with M. canis suspension containing 36x105 spores cells/mL. Each dog infected by dripping a suspension of 20 μL on the skin at the right flank. Lesion progress was observed up to day 14. Treatment with antifungal started from day 14 post-infection, administered daily for 21 days. The progress of clinical and pathological lesion observed during infection and therapy period with Wood's lamp, clinical examination and skin biopsy for histopathological examination. To establish infectious agent of ermatophytosis, the infected skin was scrapped and then cultured in Sabaroud Dextrose Agar (SDA). Hematoxylin-eosin and immunohistochemistry staining with anti-CD68 and anti-CD45 antibodies conducted to observe the morphologycal skin tissues abnormality in the epidermis, the dermis and the cells which is expressed CD68 and CD45. Therefore, clinical and pathological lesions were analysed descriptively, whereas antifungal treatment efficacy was analysed statistically using one-way ANOVA and posthoc Tukey’s test and descriptively toward the epidermal thickness and the number of macrophages and lymphocytes that express CD68 and CD45 protein respectively. The observation of clinical lesions on the skin infected by M. canis demonstrated erythema, scale, crusting, circular alopecia, and hyperpigmentation. Histopathological features showed skin abnormality such as, epidermal hyperplasia, parakeratosis, dermal inflammation, the crusts and pieces of hyphae, as well as an increased in the number of inflammatory cells that express CD68 and CD45 protein. The decrease in the severity of both clinical and histopathological lesions seen in all treatment group after single and combination therapy. Statistically, therapeutic effect of topical and systemic antifungal significantly reduced epidermal thickness (p< 0,05). Interestingly, combination therapy significantly reduced epidermal thickness compared with griseofulvin therapy, but not with ketokonazole therapy (p>0,05). To conclude, the combination therapy of topical ketoconazole and systemic griseofulvin have therapeutic effect better than single antifungal therapy against clinical and pathological features of M. canis infection in dogs.

Kata Kunci : Microsporum canis, lesi klinis, gambaran patologis, griseofulvin, ketokonazole, terapi antifungal