AKTIVITAS ANTIKANKER ALFA TERPINEOL DARI GETAH Pinus merkusii (Jungh. Et de Vriese) PADA SIKLUS SEL, APOPTOSIS DAN EKSPRESI PROTEIN (Bcl-2 dan Bax) SEL LINI MCF-7

Damiana Sapta Candrasari, Prof.dr. Sofia Mubarika Haryana

2013 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Dasar dan Biomedis

Latar Belakang: Kanker payudara merupakan kanker dengan insidensi tertinggi untuk wanita di seluruh dunia termasuk Indonesia. Terapi obat sintetik memberikan efek samping yang tidak baik bagi tubuh. Alfa terpineol merupakan senyawa yang berpotensi sebagai anti kanker berdasarkan beberapa penelitian sebelumnya terhadap beberapa sel kanker. Senyawa α-terpineol yang disintesis dari tanaman Pinus merkusii asli Indonesia belum pernah dikaji aktivitasnya pada sel MCF-7 Tujuan Penelitian: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi alfa terpineol terhadap sitotoksitas, perubahan profil siklus sel, pacuan apoptosis, dan perubahan ekspresi protein Bcl-2 serta Bax. Metode penelitian: Jenis penelitian yang dilakukan adalah kuasi eksperimental. Aktivitas sitotoksik alfa terpineol ditentukan dengan uji MTT, dimana nilai IC50 digunakan sebagai parameter sitotoksisitas. Perubahan siklus sel dianalisis dengan pewarnaan Pi dan metode flowsitometri. Pacuan apoptosis dianalisis dengan pewarnaan Annexin V-Pi dan metode flowsitometri. Efek alfa terpineol terhadap perubahan ekspresi protein Bcl-2 dan Bax dianalisis dengan metode imunositokimiawi. Hasil: Uji MTT menunjukkan alfa terpineol mampu menghambat pertumbuhan sel MCF-7dengan nilai IC50 sebesar 33μg/ml. Alfa terpineol dengan konsentrasi IC50 mampu menyebabkan akumulasi sel MCF-7 pada fase Sub-G1sebesar 18,59% dan memicu terjadinya early apoptotic sebesar 5,92%. Pacuan apoptosis oleh alfa terpineol diperkirakan melalui jalur intrinsik yang melibatkan peran mitokondria dengan terjadinya penurunan Bcl-2 sebesar 39,6% dan peningkatan ekspresi Bax sebesar 46,8% pada sel yang diberi perlakuan sebesar 0,033μg/ml. Kesimpulan: Alfa terpineol mempunyai potensi sebagai kandidat antikanker melalui penghambatan siklus sel dan pacuan terhadap apoptosis.

Background: Previous study showed that alfa terpineol from Pinus merkusii had cytotoxic effet on several cancer cell line namely T47D and HeLa. Objective: The aim of this study was to determine the effect of alfa terpineol on cytotoxicity, cell cycle changes, apoptotic and the changes expression of Bcl-2 and Bax in MCF-7 cell Methods: The cytotoxicity activity of alfa terpineol was determined using MTT assay, where the IC50 value was used as a parameter for cytotoxicity. Cell cycle changes was detected by Pi staining and flowcytometri. Annexin V-Pi staining and flowcytometry was used for detecting early apoptotic cell. The expression of Bcl-2 and Bax protein was explored by immunocytochemistry. Result: MTT assay showed that alfa terpineol inhibited the growth of MCF-7 with the IC50 value of 33μg/ml. Treatment using the dosage of the IC50 of alfa terpineol increased cell accumulation in Sub-G1 phase and caused early apoptotic cell 5,92% compare to control. Evaluation of alfa terpineol decreased level of Bcl-2 and increased level of Bax. This result showed that alfa terpineol induce apoptosis through mechanism via mitochondrial pathway. Conclusion: It is showed that alfa terpineol has the potential as anticancer agent and its mechanism are through inhibition of cell cycle and stimulation of apoptosis.

Kata Kunci : Alfa terpineol, MCF-7, sitotoksik, apoptosis