PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE PENETAPAN KADAR METOPROLOL DALAM SPIKED PLASMA DENGAN HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY YANG DIDAHULUI DENGAN DERIVATISASI MENGGUNAKAN 1-FLUORO-2,4 -DINITROBENZEN

BEKTI NUGRAHENI, Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt.,

2013 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Metoprolol atau 1-[4-(2-Methoxyethyl)phenoxy]-3-[(1-methylethyl)amino]- 2-propanol adalah antagonis reseptor ß1-adrenergik yang sering digunakan untuk terapi gangguan kardiovaskular seperti hipertensi, aritmia, dan gagal jantung. Metoprolol mempunyai nilai A 1% 1cm = 52a dalam larutan asam pada panjang gelombang 274 nm dimana nilai absortivitas molar (? ) sebesar 1390,48 L/(mol.cm) sehingga metoprolol memberi absorbsi lemah pada daerah UV(? ~ 1000 L/(mol.cm)). Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan dan memvalidasi suatu metode penetapan kadar metoprolol dalam spiked plasma dengan HPLC. Metode ini berdasarkan reaksi antara metoprolol dengan FDNB dalam asetonitril yang terjadi dengan adanya dapar borat pH 10,0 pada suhu kamar selama 80 menit. Metoprolol-DNB diukur pada serapan maksimum yaitu 249 nm. Pemisahan dilakukan dengan HPLC dengan fase diam Chromolith RP-18e (100 mm x 4,6 mm, 2 µm) dan fase gerak asetonitril : dapar asetat 0,2 N pH 3,0 (30:70) dengan laju alir 1,0 mL/menit Metode ini divalidasi berdasarkan parameter-parameter akurasi, presisi, linearitas, selektivitas, LOD dan LOQ. Hasil linieritas pada 300-1000 ng/mL diperoleh persamaan kurva baku y = 1,000x – 1051, dengan r = 0,9974. LOD dan LOQ dipe roleh nilai 79,92 ng/mL dan 266,41 ng/mL, sedangkan % rekoveri 95,27 – 102,29%. Hasil penelitian dapat disimpulkan memenuhi persyaratan validasi.

Metoprolol or 1 - [4 - (2-Methoxyethyl) phenoxy] -3 - [(1-methylethyl) amino]-2-propanol is a n antagonist of ß1-adrenergic receptor and is commonly used in the treatment of cardiovascular disorders such as hypertension, arrhythmia, and heart failure. Metoprolol has A 1% 1cm = 52a in aqueous acid at a wavelength of 274 nm which the molar absorptivity (? ) of 1390,48 L/(mol.cm). Metoprolol gave weak absorption in the UV (? ~ 1000 L/ (mol.cm)). This study aims to develop and validate a method to determine metoprolol concentration in spiked plasma by HPLC. Method used in this experiment based on the reaction between metoprolol and FDNB in acetonitrile. This solution was buffered with borate buffer at pH 10.0 and carried out at room temperature for 80 minutes. UV absorption of Metoprolol- DNB was measured at 249 nm. HPLC separation was performed by HPLC stationary phase Chromolith RP-18e (100 mm x 4.6 mm, 2 µm) and mobile phase of acetonitrile : acetate buffer 0.2 N pH 3.0 (30:70) with flow rate of 1. 0 mL/min. The method was validated based on the parameters of accuracy, precision, linearity, selectivity, LOD and LOQ. The linearity result at 300-1000 ng/mL obtained by standard curve equation y = 1.000 x +1051, with r = 0,9974. The LOD and LOQ are 79. 92 ng/mL and 266. 41 ng/mL respectively, while the% recovery from 95.27 to 102.29%. These results met the validation requirements.

Kata Kunci : metoprolol, FDNB, validasi metode, HPLC, plasma