RESEPTIVITAS ENDOMETRIUM PENDERITA ENDOMETRIOSIS Kajian Biologi Molekuler: Ekspresi Mucin-1, Leukemia Inhibitory Factor, Cyclooxygenase-2 dan Polimorfisme Gena Mucin-1, Cyclooxygenase-2

Uki Retno Budi Hastuti, dr., Sp.OG, Prof. dr. Djaswadi Dasuki, Sp.OG(K), MPH, Ph.D.,

2012 | Disertasi | S3 Kedokteran Umum

Endometriosis merupakan penyakit yang dipengaruhi hormon estrogen serta ditandai adanya jaringan endometrium atau jaringan seperti endometrium berimplantasi di luar kavum uteri dan mengakibatkan peradangan. Pada wanita dengan endometriosis, reseptivitas endometrium menurun karena berbagai faktor, sehingga syarat keberhasilan implantasi embrio terganggu. Implantasi embryo memerlukan proses yang harmonis yaitu aposisi, adesi dan invasi hasil konsepsi ke dalam epitel endometrium maternal. MUC-1, COX-2 dan LIF diproduksi oleh endometrium dan merupakan syarat mutlak bagi implantasi. Penelitian case-control sering disebut juga dengan penelitian retrospektif dengan variabel terikat (dependent variable) adalah endometriosis, stadium endometriosis, dan reseptivitas endometrium. Variabel terikat diukur pada saat diagnosis endometriosis berdasarkan pemeriksaan klinik dan laparaskopik. Kelompok kontrol adalah pasien normal yang menjalani MOW. Variabel bebas (independent variable) adalah ekspresi MUC-1, LIF, COX-2, polimorfisme MUC-1 dan polimorfisme COX-2. Penelitian case-control ini bertujuan mengkaji gangguan reseptivitas endometrium pada pasien endometriosis yang berhubungan defek penurunan reseptivitas endometrium pada fase sekresi (hari ke 19 -24). Sampel penelitian diambil dari pasien endometriosis yang menjalani laparaskopi dan pasien normal saat dilakukan MOW dengan masing-masing sampel sejumlah 35 pasien untuk endometriosis dan untuk pasien normal 32 orang. Metode immunohistokimia dilakukan untuk memeriksa ekspresi MUC-1, COX-2 dan LIF melalui pengambilan biopsi endometrium hari ke 19 hingga ke 24 (fase sekresi). Pemeriksaan Polimorfisme Gena MUC-1 dengan Amplification Refractory Mutation System (ARMS) dan Polimorfisme Gena COX-2 dengan Polymerase Chain Reaction - Restriction Fragment Lenght Polymorphism (PCRRFLP). Hasil penelitian menunjukkan peningkatan ekspresi MUC-1 penderita endometriosis dengan nilai OR =14,84; CI 95%=1,25-175,51; p=0,03. Ekspresi MUC-1 yang terlalu tinggi pada pasien endometriosis mempengaruhi adanya perubahan adesi embrio saat implantasi ke dinding endometrium. Hasil pengukuran ekspresi COX-2 antara kelompok endometriosis dengan kelompok kontrol memperlihatkan ekspresi COX-2 pada endometriosis lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok kontrol serta perbedaan yang bermakna dengan nilai OR=8,50; CI 95%=2,06-35,08; p=0,01. Ekspresi LIF endometriosis lebih rendah dibanding kelompok kontrol dengan nilai OR=12,35; CI 95%=3,84-39,76; p=0,01. Peran LIF sebagai biomarker di dalam implantasi terlihat pada fas proliferasi dan fase sekresi dimana ekspresi LIF meningkat pada saat window of implantation karena pengaruh progesteron. Perubahan ekspresi LIF berakibat gangguan pada proses invasi embrio ke dinding endometrium. Tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara genotip AA, GA dan GG terhadap ekspresi MUC-1 antara kedua kelompok. Distribusi alel A dan alel G MUC-1 tidak berbeda secara bermakna. Terlihat hubungan antara genotipe GC dan GG dengan ekspresi COX-2 yang berbeda bermakna dengan OR=1,94; CI 95%=0,57-6,58; p=0,08. Telihat bahwa untuk GC pada endometriosis lebih tinggi xviii dibanding kelompok kontrol. Gabungan genotipe AAGC paling berisiko untuk kejadian endometriosis dengan nilai OR=6,43; CI 95%=1,09-37,62; p=0,01. Kombinasi gabungan GAGG juga berisiko endometriosis dengan tingkat risiko untuk kejadian endometriosis dengan OR=3,00; CI 95%=0,84-10,67 ; p=0,07 serta referensi AAGG sebagai gabungan genotip yang normal. Disimpulkan bahwa ekpresi MUC-1 pada penderita endometriosis lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok normal. Ekpresi COX-2 pada penderita endometriosis lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok normal. Ekpresi LIF pada penderita endometriosis lebih rendah dibandingkan dengan kelompok normal. Distribusi frekwensi polimorfisme pada masing-masing MUC-1 serta COX-2 tidak bermakna namun distribusi frekwensi polimorfisme kombinasi genotipe MUC-1 dan COX-2 yaitu AAGC adalah lebih tinggi pada endometriosis dibanding kontrol dan bermakna.

Endometriosis is a disease affected by estrogen hormones, which also indicated by the existence of endometrium tissues or similarly an endometrium implanted tissue outside the cavum uterine and resulting to inflammation. In women with endometriosis, the endometrial receptivity is declining due to several factors, hence the condition in the success for embrio implantation becomes distracted. Embryo implantation requires the closely harmonized processes of apposition, attachment, and adhesion of the conceptus to the maternal endometrial epithelium. MUC-1, COX-2 and LIF are produced by the endometrium and are absolutely required for implantation. Case-control freqwently mentioned as retrospective study with dependent variable of endometriosis, endometriosis stadium, and endometrial receptivity. The dependent variables were assessed when diagnosing endometriosis based on laparoscopic and clinical examinations. The objective of this case-control study is to investigate endometrium receptivity disorders on endometriosis patients relating defects endometrium receptivity decline at secretory phase (the day 19th- 24th). The research samples was taken from endometriosis patients whose under laparoscopic surgery and the normal patients wheCasen sterilized, in which of each sample was 35 endometriosis patients and 32 non endometriosis patients. Immunohistochemistry methode was conducted for examining the expression of MUC-1, COX-2 and LIF takes endometrial biopsy at secretory phase (the day 19th-24th) by Immunohistochemistry. Examining MUC-1 polymorphism by Amplification Refractory Mutation System (ARMS) and Gene COX-2 Polymorphism by Polymerase Chain Reaction - Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP). The research's result show the increas of MUC-1 expression in endometriosis patients with OR=14,84; CI 95%=1,25-175,51; p=0,03. The higher MUC-1 expression on endometriosis patients causes the difference in endometrial receptivity. A rather higher MUC-1 expression on endometriosis patients affects the embryo adhesion during implantation to the endometrium wall. The assesment result of COX-2 expression between the endometriosis group and controlled group have significant differences with OR=8,50; CI 95%=2,06-35,08; p=0,01. This result shows that the COX-2 expression on endometriosis is higher than controlled group. The endometriosis LIF expression was lower than controlled group significantly with OR=12,35; CI 95%=3,84-39,76; p=0,01. LIF role as biomarker in implantation shown on the proliferation and secretion phases, in which the LIF expression is escalating at the window of implantation because of the progesterone. The LIF expression change resulting in the disturbance of embryo invasion process to the endometrium wall. There is not any significant difference between genotype AA, GA and GG towards the MUC-1 expression between two groups. Alele A distribution and alele G of MUC-1 were not different significantly. There was relationship between genotype GC and GG with COX-2 expression wich was different significantly with OR=1,94; CI 95%=0,57-6,58; p=0,08. It shown that the endometriosis had xx higher GC than controlled group. At the combination test of AAGC genotype with OR=6,43; CI 95%=1,09-37,62; p=0,01. It also goes to the GAGG group that has OR=3,0; CI 95%=0,84-10,67; p=0,07 and refference AAGG as the normal genotype combination. It was concluded that MUC-1 expression on endometriosis is higher than control. COX-2 expression on endometriosis is higher than control. LIF expression on endometriosis is lower than control. Polymorphism frequency distribution of MUC-1 and COX-2 are not different but there are differentiations in frequency distribution of genotype combination, which AAGC is higher on endometriosis than control and significant.

Kata Kunci : MUC-1, COX-2, LIF, endometrium, receptivity, endometriosis