AKTIVITAS HESPERIDIN SEBAGAI AGEN KOKEMOTERAPI BERTARGET P-GLIKOPROTEIN DAN IKK UNTUK MENGATASI RESISTENSI PADA SEL MCF-7 RESISTEN DOKSORUBISIN

RIFKI FEBRIANSAH, Dr. Agung Endro Nugroho, M.Si., Apt

2012 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Doksorubisin merupakan salah satu agen kemoterapi yang umum digunakan untuk mengobati kanker payudara, akan tetapi, doksorubisin dapat menginduksi terjadinya resistensi pada beberapa jenis kanker di antaranya kanker payudara. Salah satu mekanisme resistensi dari doksorubisin tidak terlepas dari adanya overekspresi protein Pgp, yang merupakan pompa efflux senyawa xenobiotik keluar dari sel. Penelitian ini bertujuan untuk mengatasi terjadinya resistensi dari doksorubisin pada sel MCF-7 resisten doksorubisin (MCF-7/DOX) dengan senyawa aktif flavonoid di dalam jeruk, yaitu hesperidin. Sel MCF-7 digunakan sebagai model sel chemoresistance pada penelitian ini. Sel MCF-7/DOX ditumbuhkan dalam media DMEM yang mengandung 25 nM doksorubisin selama 5 minggu. Uji sitotoksik hesperidin dan kombinasinya dengan doksorubisin pada sel MCF-7/DOX dilakukan dengan metode MTT. Uji induksi apoptosis dilakukan dengan metode double staining menggunakan etidium bromida-akridin oranye. Uji imunositokimia dilakukan untuk menentukan tingkat ekspresi dan lokalisasi dari protein Pgp. Dalam penelitian in silico, digunakan program PLANTS untuk mengetahui interaksi antara hesperidin dengan reseptor Pgp dan IKK. Pemberian tunggal hesperidin menunjukkan aktivitas sitotoksik pada sel MCF-7/DOX dengan IC50 sebesar 11 μM. Hasil uji kombinasi perlakuan hesperidin dan doksorubisin memberikan efek adiktif dan antagonis (CI>1,0). Hesperidin tidak mampu meningkatkan induksi apoptosis, tetapi dapat menurunkan ekspresi Pgp bila dikombinasikan dengan doksorubisin pada konsentrasi rendah. Dari studi in silico menunjukkan bahwa hesperidin memiliki afinitas yang tinggi untuk berinteraksi dengan reseptor Pgp dan IKK. Penelitian ini menunjukkan bahwa hesperidin berpotensi untuk diterapkan sebagai agen kemopreventif dalam terapi resistensi kanker payudara.

Doxorubicin is a chemotherapeutic agent used to treat breast cancer, but it induces resistance in some cancers especially in breast cancer. One of the doxorubicin resistance mechanism was resulted from Pgp overexpression, which is an energy dependent pump effluxing xenobiotics out from cells. This study was aimed to overcome resistance of doxorubicin in MCF-7 resistant doxorubicin cells (MCF-7/Dox) with flavonoid active compound in citrus, hesperidin. The MCF-7 resistant doxorubicin (MCF-7/DOX) cells were maintained in 25 nM dox-contained medium for 5 weeks. The cytotoxic properties, 50% inhibition concentration (IC50) of hesperidin and its combination with doxo in MCF-7/DOX cells were determined using MTT assay. Apoptosis induction was examined by double staining assay using etidium bromide-acridine orange. Immunocytochemistry assay was performed to determine the level and localization of Pgp. For In silico study, docking PLANTS program was used to investigate the interaction of hesperidin on IKK and Pgp protein reseptor. Single treatment of hesperidin showed cytotoxic activity on MCF-7/DOX cells with IC50 value of 11 μM. The combination treatment of hesperidin and doxorubicin showed additive and antagonist effect (CI>1,0). Hesperidin did not increase the apoptotic induction, but decreased the Pgp expressions level when combined with doxorubicin in low concentration. The result of in silico study showed that hesperidin has high affinity to interact with IKK and Pgp reseptor. This research indicated that hesperidin is potential to be applied as a chemopreventive agent in resistant breast cancer therapy.

Kata Kunci : hesperidin, doksorubisin, sel MCF-7/DOX, Pgp, molecular docking