AKTIVITAS ANTIKANKER GENISTEIN SEBAGAI PERUSAK G2 ARREST YANG DIINDUKSI KURKUMIN PADA SEL KANKER PAYUDARA T47D

ESTI DYAH UTAMI, Prof. Dra. Sismindari, SU., Ph.D., Apt

2012 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Kanker merupakan penyebab kematian utama di dunia. Lebih dari 50% sel kanker mengalami defect pada gen p53. Sel kanker dengan mutasi p53 lebih resisten terhadap agen antikanker perusak DNA, sehingga diperlukan pengembangan agen antikanker dengan mekanisme yang lebih baik. Agen kemoterapi konvensional belum memberikan hasil memuaskan, bahkan dapat menimbulkan efek samping, sehingga mendorong pada pemanfaatan bahan alam sebagai alternatif terapi kanker. Kurkumin (diferuloylmethane) dilaporkan dapat menginduksi penghentian siklus sel fase G2 (G2 arrest) pada beberapa tipe sel kanker. Penelitian lain melaporkan bahwa genistein mampu menghambat fosforilasi CDK1, gen yang terlibat pada transisi G2/Mitosis, sehingga dapat berpotensi sebagai perusak G2 checkpoint akibat pemberian kurkumin. Penghambatan G2 arrest merupakan salah satu alternatif strategi yang dapat membunuh sel kanker dengan mutasi p53 secara selektif, dan potensial untuk dikombinasikan dengan agen perusak DNA seperti kurkumin. Efektivitas kematian sel akibat pemberian kurkumin dapat meningkat dengan pemberian piperin. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengevaluasi kemampuan kurkumin dalam meninduksi G2 arrest pada sel kanker payudara T47D yang mengalami mutasi p53, mempelajari kemampuan genistein dalam merusak penghentian siklus sel yang diinduksi oleh kurkumin, mengevaluasi pengaruh genistein dalam meningkatkan efektivitas kematian sel T47D setelah perlakuan kurkumin, serta untuk mengetahui efek piperin terhadap profil siklus sel T47D. Efek kurkumin dalam menginduksi G2 arrest, efek genistein dalam merusak penghentian siklus sel yang diinduksi oleh kurkumin, dan efek piperin terhadap profil siklus sel T47D dipelajari dengan flowcytometry assay. Pengaruh genistein dalam meningkatkan kematian sel T47D setelah perlakuan kurkumin ditetapkan dengan uji MTT. Pada penelitian ini diketahui bahwa kurkumin pada kadar optimal 10 μM mampu menginduksi G2 arrest pada sel T47D yang mengalami mutasi pada gen p53. Peningkatan konsentrasi sampai dengan 30 μM tidak meningkatkan jumlah populasi sel pada fase G2. Genistein mampu merusak G2 arrest yang diinduksi oleh kurkumin pada konsentrasi optimal 20 μM. Genistein juga mampu meningkatkan kematian sel T47D dengan perbedaan yang signifikan (sig = 0.000) dibandingkan dengan perlakuan kurkumin tunggal. Pemberian piperin sampai kadar 50 μM tidak mempengaruhi siklus sel T47D

Cancer is the leading cause of death in the worldwide. More than 50% of cancer cells have defects in the p53 gene. Cancer cells with p53 mutations may be resistant to antineoplastic drugs that produce DNA damage, urge the finding of new drugs having better mechanisms. Conventional chemotherapeutic agents have not provided satisfactory results and may cause side effects, this encourages the use of natural ingredients as an alternative of cancer therapy. Curcumin (diferuloylmethane) is reported to induce G2 phase cell cycle arrest in some cancer cell lines. Other study reported that Genistein inhibited phosphorylation of CDK1, gene involved during G2/M transition and thus could function as G2 checkpoint abrogator. Abrogation of G2 arrest is one of alternative strategy which could selectively kill cancer cells with mutated p53, and potentially be combined with DNA damaging agent such as curcumin. Anticancer activity of curcumin can be improved by the addition of piperine. The aims of this research is to evaluate the ability of curcumin to induce G2 arrest in human breast cancer T47D cells which is mutant for p53 function, to study the ability of Genistein to abrogate the cell cycle arrest induced by curcumin in T47D, to evaluate the effect of genistein to enhance the T47D cell death following curcumin treatment, and to determine the effect of piperine on T47D cell cycle profile. The effect of curcumin to induce G2 arrest, the effect of genistein to abrogate the G2 arrest induced by curcumin, and effect of piperine on cell cycle profile was studied in T47D cells by flowcytometry assay. The effect of genistein to enhance the T47D cell death following curcumin treatment were determined by MTT assay. In this research, curcumin induced G2 arrest at the optimum concentration of 10 μM when it was administered on T47D cell having p53 mutation. Increasing concentration up to 30 μM did not further increase the G2 phase cell population. Genistein abrogated G2 arrest induced by curcumin in T47D cells, with the optimum concentration of 20 μM. Genistein also increased T47D cell death with a significant difference (sig = 0.000) compared to single curcumin treatment. Piperine up to levels 50 μM did not affect T47D cell cycle profile.

Kata Kunci : G2 arrest, T47D, kurkumin, genistein, piperin