EFEK EKSTRAK ETANOLIK TUMBUHAN SARANG SEMUT (Hydnophytum formicarum) TERHADAP PROLIFERASI SEL LIMFOSIT, VERO DAN T47D DENGAN PENAMBAHAN DOXORUBICIN SECARA IN VITRO

David Darwis, Prof. Dr. Ediati Sasmito, SE., Apt,

2012 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Tumbuhan Sarang Semut (Myrmecodia tuberosa and M. pendans) telah dilaporkan pada penelitian in vitro sebelumnya memiliki kemampuan meningkatkan proliferasi limfosit dan bersifat sitotoksis terhadap sel kanker. Dengan demikian tumbuhan tersebut berpotensi untuk dikembangkan sebagai terapi pendamping Doxorubisin (Dox), untuk mengatasi efek samping obat yaitu menekan sistem imum. Belum dilaporkan efek tersebut pada ektrak tanaman Sarang semut lain yaitu Hydnophytum formicarum, dan apakah residu semut berperanan dalam aktivitasnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek dari ekstrak tumbuhan tersebut dan juga residu semutnya terhadap aktivitas proliferasi limfosit mencit dan efek sitotoksisnya terhadap sel Vero dan T47D pada pemberian Doxorubicin secara in vitro. Sampel tumbuhan dikoleksi dari Papua Bara. Setelah hipocotyl diiris, sebagian sampel dikeringkan langsung untuk memperoleh tumbuhan dengan residu semut (B), sedangkan bagian yang lain dipisahkan antara tumbuhan dan residu semut untuk memperoleh tumbuhan tanpa residu semut (A) dan residu semut (C). Sampel yang sudah dikeringkan dengan oven dimaserasi dalam etanol 96% dan dilanjutkan dengan penguapan menggunakan vakum, untuk memperoleh ekstrak A, B, dan C. Masing-masing ekstrak diuji efeknya terhadap aktivitas proliferasi limfosit yang diperoleh dari mencit Balb/c, dan terhadap sel Vero dan T47D menggunakan metode MTT pada berbagai variasi dosis (10, 20, 50, 100, dan 200 μg/ml) dengan penambahan Dox. Vaksin Hepatitis B (Engerix BÒ) digunakan sebagai antigen. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan ANOVA dan paired sample T-test. Profil kromatografi lapis tipis (KLT) masing-masing ekstrak dievaluasi untuk mengidentifikasi perbedaan dalam kandungan kimia. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak A dan B dapat meningkatkan proliferasi limfosit dengan meningkatnya dosis. Keduanya tidak meningkatkan proliferasi sel Vero dengan penambahan Dox. Hanya saja, penambahan ekstrak A dan B ternyata dapat meningkatkan proliferasi sel T47D dengan meningkatnya dosis (12,5, 25, 50, 100, dan 200 μg/ml). Ekstrak C tidak menunjukkan aktivitas pada semua uji. Tidak teramati adanya perbedaan kandungan kimia antara ekstrak A dan B secara kualitatif. Ekstrak A secara KLT dengan berbagai penampak bercak mengandung : flavonoid, fenolik, aldehid / keton dan tanin.

Ant plants (Myrmecodia tuberose and M. pendans) extracts have been reported in previous research to have capability in increasing lymphocyte proliferation but being cytotoxic to cancer cell lines. It was expected that the plant extracts can be used as complement to Doxorubicin (Dox), in order to overcome the drug’s immunosuppresant activity. There was no report so far whether another ant plant, i.e. Hydnophytum formicarum also possesses the same activity and whether its ant residue plays a role in the activity. This research aim was to explore the effect of the extracts of this plant and the ant residue on proliferation activity of mouse lymphocyte as well as their cytotoxic effects on Vero and T47D's cell lines in Dox exposure by in vitro technique. Ant plant samples were collected from West Papua. After the hypocotyls were sliced, some parts were dried directly to gain plant with ant residue (B), while other parts were separated from the ant residue to gain plant without ant residue (A) and ant residue (C). Oven dried samples were macerated in 96% ethanol, followed by vacuum evaporation to yield ethanol extract of A,B, and C. Each extract was tested its effect on proliferation activity of Balb/c mice lymphocytes, as well as on T47D and Vero cell lines by MTT assay in various dose (10, 20, 50, 100, and 200 μg/ml) in Dox presence. Hepatitis B vaccine (Engerix BÒ) was used as antigen. Data obtained were analyzed by ANOVA and paired sample T-test. Thin layer chromatography profile of each extract was evaluated to identfy the difference in chemical contents. The result showed that extracts A and B had ability to increase lymphocyte proliferation by increasing dose. Both extracts did not increase Vero cells proliferation in the presence of Dox. However, the addition of extracts A and B increased proliferation of T47D with increasing dose applied. Extract C showed no activity in all assays. There was no chemical content difference observed on extracts A and B. Extract A contained flavonoid, phenolic, aldehyde / ketone and tannin according to TLC detection method with various detection reagents..

Kata Kunci : Sarang semut (Hydnophytum formicarum), proliferasi limfosit, sitotoksis, uji MTT, profil KLT