EFEK SITOTOKSIK, PROLIFERASI DAN APOPTOSIS FRAKSI AKTIF AKAR TUMBUHAN MEKAI (Albertisia papuana Becc.) TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA (T47D)

WIDYASARI, Prof. Dr. Istriyati, MS.

2012 | Tesis | S2 Biologi

Tumbuhan obat merupakan potensi Kalimantan Timur yang terpendam yang perlu digali karena bernilai jual tinggi. Salah satu tumbuhan obat tersebut adalah tumbuhan mekai yang digunakan oleh masyarakat dayak untuk pengobatan berbagai penyakit degeneratif seperti hipertensi, stroke dan kanker. Untuk pengobatan kanker yang biasa digunakan adalah akar mekai, namun secara ilmiah pengaruh akar mekai terhadap sel kanker belum diteliti. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek sitotoksik akar mekai terhadap sel kanker payudara (T47D). Akar tumbuhan mekai diekstraksi secara bertingkat dengan kloroform dan metanol, serta direbus dengan air. Semua ekstrak diujikan terhadap sel kanker payudara (T47D) dengan metode MTT Assay. Ekstrak yang paling toksik difraksinasi dengan metode Vaccum Liquid Chromatography (VLC) dan diikuti dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Profil KLT yang mirip digabung, terhadap fraksi gabungan dilakukan MTT Assay. Terhadap fraksi gabungan paling aktif selanjutnya dilakukan pengujian proliferasi dengan cara penggandaan waktu inkubasi (doubling time), serta pengujian apoptosis menggunakan metode double staining. Untuk penentuan golongan senyawa pada fraksi aktif tersebut, digunakan berbagai macam penampak bercak yang spesifik. Uji sitotoksisitas dengan metode MTT Assay menunjukkan bahwa ekstrak kloroform akar mekai mempunyai efek sitotoksik paling tinggi terhadap sel T47D (IC-50 4,418 μg/ml), diikuti dengan ekstrak metanol akar mekai (IC-50 37,892 μg/ml ) dan air rebusan akar mekai (IC-50 113,207 μg/ml). Uji sitotoksisitas fraksi gabungan menunjukkan bahwa fraksi III dari ekstrak kloroform mempunyai efek sitotoksik paling tinggi terhadap sel kanker payudara (T47D) dengan IC-50 = 0,913 μg/ml, dan fraksi tersebut merupakan fraksi yang dapat memacu apoptosis dan menghambat proliferasi sel T47D. Pada penelitian ini juga didapatkan bahwa akar mekai mengandung bioaktif alkaloid. Dengan ini dapat disimpulkan bahwa akar mekai dapat menghambat proliferasi dan memacu apoptosis sel kanker payudara (T47D) dan senyawa aktif yang terdapat adalah alkaloid.

Medicinal plants of East Kalimantan needs to be explored because of high value. One of these medicinal plants are mekai that usually use by the Dayak community for the treatment of various degenerative diseases such as hypertension, stroke and cancer. The commonly used for cancer treatment is the root of mekai, the scientific studies of the effect of mekai on the growth of cancer cells has not been done. Therefore the objectives of this study was to determine the cytotoxic effect of mekai root on breast cancer cells (T47D). The roots of mekai plant were extracted gradually using chloroform and methanol, and boiled with water. All extracts were tested on breast cancer cells (T47D) by MTT Assay method. The most toxic extract was fractioned by Vaccum Liquid Chromatography (VLC) and followed by Thin Layer Chromatography (TLC). The similar TLC profiles were combined. The toxicity of the combined fraction were tested on the T47D cells again by the MTT Assay. And the effect of the proliferation of the most toxic fraction were done by doubling time assay and the apoptosis test were done by double staining method. The most toxic fraction was also analyzed using TLC followed by the application of various detection reagents for identification of the active compound. Test cytotoxicity by MTT assay method showed that the chloroform extract of the mekai roots had the highest cytotoxic effect on T47D cells (IC-50 4.418 ug/ml), followed by methanol extract (IC-50 37.892 ug/ml) and water decoction mekai roots (IC-50 113.207 ug/ml). Cytotoxicity test showed that the combined fraction of chloroform extract fraction III had the highest cytotoxic effect against breast cancer cells (T47D), IC- 50 = 0,913 ug/ml. And these fraction also inhibit proliferation and induced apoptosis of T47D cells. The active compound in those fraction was alkaloid. It could be concluded that mekai root extract could inhibit proliferation and increased apoptosis of breast cancer cell (T47D), the active compound in mekai root was alkaloid.

Kata Kunci : T47D, proliferasi, apoptosis, MTT assay, mekai