Spirulinaplatensis SEBAGAI IMUNOSTIMULAN: EFEK TERHADAP TOKSOPLASMOSIS

SORTA BASAR IDA S., DRA., MSI ., Prof. Sukarti Moeljopawiro, Ph.D.

2012 | Disertasi | S3 Biologi

Toksoplasmosis adalah penyakit infeksi yang disebabkan oleh parasit intraseluler Toxoplasma gondii, dapat menginfeksi hewan maupun manusia dan sampai sekarang masih sulit ditanggulangi. Salah satu cara penanggulangan toksoplasmosis adalah dengan meningkatkan kekebalan tubuh misalnya menggunakan imunostimulator Spirulina platensis.Tujuan penelitian ini adalah untuk: 1.determinasiekstrak Spirulina platensis yang paling potensial meningkatkan respon imunhumoral, 2. determinasifraksi yang paling potensial dalam meningkatkan respon imun humoral dan respon imun seluler, 3. identifikasi senyawa bioaktif dari fraksi aktif yang paling berperan meningkatkan respon imun humoral dan respon imun seluler, 4.mengetahui apakahSpirulina platensisdapat sebagai imunostimulator dan mengendalikan toksoplasmosis. Penelitian ini dilakukan dalam 3 tahap, yaitu: Tahap satu, pengujian ekstrak pada mencit. Spirulina platensis diekstraksi dengan akuabides dan etil asetat. Sebanyak 60 ekor mencit Balb/c dibagi menjadi 10 kelompok.Ekstrak etil asetat, ekstrak air dan larutanSpirulina platensis alami diberikan secara oral dengan dosis 5, 10, 15 mg/mlyang dilarutkan dalam 0.75% tween - 40 selama 14 hari berturut-turut. Perlakuan kontrol hanya diberi 0.75% tween - 40. Pada hari ke-15 semua mencit diinfeksi dengan takizoit kepadatan 103 sel/ml. Darahdiambil sebelum dan 7 hari setelah diinfeksi dengan takizoit. Tahap kedua, pengujian fraksi pada mencit. Ekstrak potensial dipartisi dengan metanol.Senyawa bioaktif ekstrak diisolasi dengan Kromatografi Lapis Tipis Preparatif dan diperoleh tiga fraksi.Fraksi diberikan pada60 ekor mencit Balb/c yang dibagi menjadi 4 kelompok. Perlakuan diberikan secara oral selama 14 hari berturut-turut dengan dosis 3 mg/ml/ekor mencit dan perlakuan kontrol diberi tween 40. Pada hari ke-15 semua mencit diinfeksi dengan takizoit kepadatan 107 sel/ml. Sampel darah, makrofag peritoneum dan limfosit untuk kultur diambil hari ke-0 (sebelum diinfeksi dengan takizoit), serta hari ke-1, ke-2, ke-3 dan hari ke-4 setelah diinfeksi dengan takizoit. Tahap ketiga, xxiv?? ?? identifikasi senyawa bioaktif fraksi potensial dilakukan dengan spektroskopi UV-Vis, IR dan GC-MS. Hasil penelitian menunjukkan bahwa respon IgG tertinggi terdapat pada kelompok ekstrak etil asetat dosis 10 mg/ml, dari 2.02067 sebelum diinfeksi dengan takizoit menjadi 3.00867 setelah diinfeksi dengan takizoit. Hasil KLT preparatif menunjukkan bahwa fraksi tengah paling aktif dapat meningkatkan respon IgG tertinggi hari ke-3 2.608, respon IgM hari ke-1 2.898, konsentrasi IL-4 serum hari ke-2 65.540 pg/ml, konsentrasi IL-4 kultur limfosit hari ke-4 221.105 pg/ml, konsentrasi IL-2 kultur limfosit hari ke-3 118.568 pg/ml setelah diinfeksi dengan takizoit, indeks stimulasi hari ke-0 yaitu 2.092, persentase makrofag peritoneum yang mensekresi ROIs dari 41.3 menjadi 88.7 dan yang memfagositosis partikel lateks dari 33.3 menjadi 73.7 hari ke-4.Identifikasi fraksi tengah dengan GCMS diperoleh 21 senyawa bioaktif yang didominasi oleh asam palmitat (33.32%), dan asam linoleat (22.31%). Dengan ini disimpulkan S. platensisdapat sebagai imunostimulan dan mengendalikan toksoplasmosis, ekstrak etil asetat potensial meningkatkan respon imun humoral, fraksi tengah dari profil KLTP ekstrak etil asetat larut metanol S. platensismeningkatkan respon imun humoral dan respon imun seluler.

Toxoplasmosis is an infectious desease caused by intracellular parasite so call Toxoplasma gondii that infected animal as well as human and effective cure unavailable. Sprirulina platensisis one of the strategy to overcome this desease byincreasing the immune response. The objective of this research were to: 1) determine the activity of Spirulina platensisextract toincrease humoral immune response; 2)determine the activity of Spirulina platensisfraction to increasehumoraland cellular immune response; 3) identifythe bioactive compound ofthose fractionsthat play an important role to enhance a humoral as well as cellular immune responses, 4)determine Spirulina platensisserve as immunostimulator on mice infected by tachyzoite Toxoplasma gondii. This research had been conducted in3 steps. The first was in vivo testing ofSpirulina platensis extract on mice. Spirulina platensis was extracted using a separating funnel using double destiled water and ethyl acetate. Ten groups of 6 mice (Balb/c) were treated per oral with those threeextract at dose 5,10,15 mg/ml respectively for 14 days. Extract were diluted on 0.75% tween – 40, controle group was only given 0.75% tween – 40. On the 15thday, the mice were infected with 103 cells/ml tachyzoite.The blood was taken from all group before infected and on the 7th day after infected. The best extract were than patitions using methanol, followed by preparative thin layer chromatography,and obtained three fraction, upper, midle and bottom. The second step, was testing this three fractions on mice using 60 mice that devided by four groups of 15.One group used as a controle given 0.75% tween – 40 only, the other three groups were treatedwith fractions per oral atdose 3 mg/mlfor 14 days. On the 15th day, the mice were infected with 107 cells/ml tachyzoite. The blood, peritoneum macrophage, lymphocyte were taken from all group on the day before infected and on day 1st, 2nd, 3rd, 4th after infected. The third steps was identification of bioactive compoud in the potent fraction using UV-Vis, IR and GC-MS. The results showed that 10 mg/ml of ethyl acetate extract could significantly increased IgG level from 2.02067 to 3.00867. The administration of three fraction showed that the midle fraction was the potential fraction. It gave highest the IgG response2.608 on the third day, the IgM response 2.898on the first day, serum IL-4 level 65.540 pg/ml on xxvi?? ?? the second day, IL-4 level of lymphocyte culture 221.105 pg/ml on the fourth day, IL-2 level of lymphocyte culture 118.568 pg/ml on the third day, the percentage of peritoneal macrophage secreting ROIs from 41.3 to 88.7,the percentage of peritoneal macrophage phagocyting latex beads from 33.3 to 73.7 on the fourth day, and the highest stimulation index (2.092) was found on the last day of the fraction treatment. Identification using GC-MS showed that the middle fraction concist of 21 bioactive compounds that dominated by palmitic acid (33.32%) and linoleic acid (22.31%). Itcould be concluded that the Spirulina platensisserve as immunostimulator and to overcome toxoplasmosis. The ethyl acetate extract potentialy improve humoral immune rensponses; the active middle fraction which consisted of 21bioactive compounds has a capability to improve the humoral as well as cellular immune response.

Kata Kunci : Spirulina platensis,takizoit,imunostimulator,ROIs,imun humoral, imun seluler