PENGEMBANGAN MURAMIDASE RELEASED PROTEIN SEBAGAI PERANGKAT DIAGNOSTIK SEROLOGIS INFEKSI Streptococcus suis serotipe 2

CLARA AJENG ARTDITA, Prof. Dr. drh. Siti Isrina Oktavia Salasia

2012 | Tesis | S2 Sain Veteriner

Streptococcus suis merupakan agen penyebab berbagai penyakit pada babi yang ditandai dengan meningitis, bronkopneumonia, artritis, perikarditis, poliserositis dan septisemia. Infeksi S. suis terutama serotipe 2 bersifat zoonosis, dapat menular pada manusia dengan gejala khas meningitis. Streptococcus suis pernah diisolasi pada cairan persendian babi pada tahun 2008 di Timika, Papua. Tujuan penelitian adalah mengembangkan muramidase released protein (MRP), suatu protein sebagai penanda virulensi pada S. Suis, sebagai perangkat diagnostik terhadap infeksi S. suis. Dalam penelitian ini digunakan Streptococcus suis strain P171, diidentifikasi secara biokimia dan secara molekular dengan menggunakan polymerase chain reaction (PCR) untuk mengamplifikasi gen penyandi capsular serotipe 2 (gen cps2J) dan gen penyandi MRP (gen mrp). Antigen MRP diekstraksi dengan menggunakan lysozyme dan diseparasi dengan sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Imunisasi mencit Balb/c dengan antigen MRP dengan BM 136 kDa digunakan untuk memproduksi antibodi. Respon imun mencit dievaluasi dengan enzyme linkage immunosorbent assay (ELISA). Antibodi terhadap MRP dengan BM 136 kDa berhasil dikembangkan pada hewan percobaan mencit Balb/c dengan nilai absorbansi tertinggi 3,889 (pengenceran 50x), selanjutnya digunakan sebagai bahan untuk deteksi infeksi S. suis di lapangan dengan pengenceran 200x. Antibodi poliklonal anti-MRP mampu mendeteksi keberadaan S. suis serotipe 2 secara serologis pada babi di Papua dengan hasil seropositif 40% (dengan uji dot blot) dan 50% (dengan uji ELISA).

Streptococcus suis is a bacterial pathogen that cause various disease of pigs, indicating meningitis, bronchopneumonia, arthritis, pericarditis, polyserositis and septicaemia. Streptococcus suis especially serotype 2 can infect human (zoonotic) with special symptom of meningitis. In 2008, S. suis has been isolated from synovial liquid of pig in Timika, Papua. The aim of this research was to developing muramidase released protein (MRP), an important virulence marker of S. suis, as a diagnostic tool of S. suis infection. Streptococcus suis strain P171 was used in this research, identified biochemically and genotypically by using polymerase chain reaction (PCR) to amplification the gene encoding capsular serotype 2 (cps2J gene) and the gen encoding MRP (mrp gene). The MRP antigen was extracted using lysozyme and separated by using sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Balb/c mice were imunized with 136 kDa MRP to produce antibody against MRP and the antibody were evaluated by using enzyme linkage immunosorbent assay (ELISA). The results of the research showed that the antibody against MRP with molecular weight of 136 kDa could be produced on Balb/c mice with the absorbance value of 3,889 (at 50x dilution), then could be used to detect sera of field infected pigs in Papua 200x dilution. Antibody against MRP could detect serologically of S. suis serotype 2 of pigs in Papua with seropositive results of 40% (by using dot blot) and 50% (by using ELISA).

Kata Kunci : Streptococcus suis, muramidase released protein, antibodi poliklonal