EFEK FRAKSI AKTIF BUAH MERAH (Pandanus conoideus Lamk.) TERHADAP PROLIFERASI SEL, EKSPRESI COX-2 DAN P53, SERTA AKTIVITAS FAGOSITOSIS MAKROFAG PADA KANKER PAYUDARA MODEL MENCIT C3

Lisna Hidayati, Prof. Dra. Sukarti Moeljopawiro, M. App. Sc., Ph.D.

2012 | Tesis | S2 Bioteknologi

Kanker payudara merupakan penyebab kematian utama pada wanita. Penggunaan bahan alam untuk pengobatan kanker saat ini lebih diminati. Salah satu bahan alam yang dipercaya masyarakat sebagai obat antikanker adalah buah merah (Pandanus conoideus Lamk.). Tujuan penelitian ini adalah mengetahui efektivitas fraksi aktif buah merah varietas Maler terhadap proliferasi sel, ekspresi COX-2 dan p53 mutan, serta aktivitas fagositosis makrofag peritonium pada kanker payudara model mencit C3H. Buah merah dari bukit Cycloups Sentani Papua diekstraksi dengan kloroform dan difraksinasi dengan Vacuum Liquid Chromatography (VLC) menggunakan eluen kloroform:metanol (1:1). Mencit donor dan resipien galur C3H dari Laboratorium Patologi Eksperimental Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Pemaparan dengan menyuntikkan 0,2 mL bubur tumor secara subkutan. Tiga puluh mencit resipien C3H dibagi menjadi 5 kelompok, 6 ekor per kelompok. Dua kelompok pertama sebagai kontrol (kontrol bebas dan kontrol pelarut). Kelompok kuratif I, fraksi diberikan 24 jam setelah pemaparan dan kuratif II diberikan setelah tumor teraba. Untuk kelompok preventif, fraksi diberikan 2 minggu sebelum dipapar tumor, dilanjutkan 3 minggu lagi setelah dipapar. Fraksi aktif diberikan dengan dosis 0,557 mg/hari per oral setiap hari. Perlakuan selama 21 hari. Selanjutnya mencit dinekropsi, tumor diambil untuk analisis proliferasi sel dengan teknik AgNOR, ekspresi COX-2, dan p53 mutan dengan teknik imunohistokimia. Penghitungan aktivitas fagositosis makrofag peritonium dilakukan pada kelompok kontrol bebas, kuratif II dan preventif. Hasil menunjukkan bahwa nilai mAgNOR kelompok perlakuan berbeda nyata lebih rendah dibanding kontrol (p<0,05). Demikian juga untuk ekspresi COX-2, dan tidak ditemukan ekspresi protein p53 mutan kecuali 1 sampel pada kelompok preventif. Aktivitas fagositosis makrofag kelompok preventif paling tinggi dibanding kelompok kontrol dan kuratif II secara nyata (p<0,05). Dengan ini dapat disimpulkan bahwa fraksi aktif ekstrak klorofom buah merah efektif menghambat proliferasi sel, menurunkan ekspresi COX-2 dan belum terbukti menghambat ekspresi p53 mutan, serta meningkatkan aktivitas fagositosis makrofag secara preventif.

Breast cancer is the most common cancer among Indonesian woman. Recently, buah merah (Pandanus conoideus Lamk.) have been extensively used to treat cancer. The objective of this research were to analysize the effect of buah merah on cell proliferation, COX-2 and p53 mutant expression, and macrophages phagocytosis activity of C3H mice breast cancer model. Buah merah was obtained from Cycloups Sentani Papua. C3H donor and recipient were gained from Faculty of Medicine, University of Indonesia. Mammary tumor induction was done by injecting subcutaneously of 0.2 ml tumor cell suspension in the armpit area. Mice were randomly divided into 5 groups of 6, the first 2 groups used as controls. The active fraction was given orally 0,557mg/day for 21 days to the curative I; given after 24 hours tumor injection; curative II, given at the end of latent period; while the preventif group, fraction was also given for 2 weeks before tumor injection. On the 22 th day of treatment all mice were sacrificed. Cell proliferation were analyzed using AgNOR, COX-2 and p53 expression were analyzed using immunohistochemistry, then peritoneal macrophages were isolated from control, curative II and preventif groups for examinating the macrophages phagocytosis activity. mAgNOR score of treatment groups were significantly (p<0.05) lower than control, likewise for the expression of COX-2. However, the expression of p53 mutant has not been detected, except one sample in the preventive group. Macrophage phagocytosis activity of preventive was the significantly highest (p<0.05) among the rest. It could be concluded that the active fraction of chloroform extract of buah merah can inhibit cell proliferation, decrease the expression of COX-2, the influence of mutant p53 protein expression has not been seen, and increase the macrophage phagocytosis activity preventively.

Kata Kunci : fraksi aktif buah merah, kanker payudara, mAgNOR, COX-2, p53, makrofag