PENGARUH EKSTRAK ETANOL DAUN MAHKOTA DEWA (Phaleria macrocarpa (Scheff Boerl) TERHADAP AKTIVITAS SEL NK DAN MAKROFAG MENCIT

Muhammad Gufron, Drs.,MS., Prof. dr. Marsetyawan HNE Soesatyo, PhD.

2011 | Disertasi | S3 Kedokteran Umum

Latar belakang: Daun mahkota dewa (Phaleria macrocarpa Scheff Boerl) sebagai salah satu varietas tumbuhaan obat asli Indonesia secara empiris menunjukkan potensi kemampuan meningkatkan status kekebalan tubuh. Tujuan: Penelitian dilakukan secara eksperimental di laboratorium untuk mengetahui pengaruh ekstrak etanol daun mahkota dewa terhadap aktivitas makrofag dan sel NK1.1. Aktivitas makrofag meliputi fagositosis, sekresi ROI, dan sintesis IL-12. Sel NK1.1 dikaji pada aktivitas sitotoksik, ekspresi reseptor CD122, NKG2D, dan sintesis IFNγ.. Metode: Mencit galur Balb/c digunakan untuk uji aktivitas makrofag peritoneal, galur C57BL/6 untuk aktivitas splenosit NK1.1. Ekstrak etanol daun mahkota dewa diberikan selama 30 hari pada 6 kelompok mencit yang masing masing terdiri atas 5 ekor. Kelompok I, II dan III diberi perlakuan dengan dosis 1,05, 2,10 dan 4,20 mg/20 g berat badan. Kelompok IV, V, dan VI diberi perlakuan sama seperti pada tiga kelompok sebelumnya kemudian mencit diinokulasi dengan 10 4 cfu L. monocytogenes selama 48 jam. Kelompok VII sebagai kontrol negatif diberi carboxyl methyl cellulosa Na 0,5%. Kelompok VIII mencit diinokulasi dengan 10 4 cfu bakteri L. monocytogenes selama 48 jam tanpa perlakuan lain. Hasil penelitian: Ekstrak etanol daun mahkota dewa dapat meningkatkan aktivitas fagositosis dan sekresi ROI makrofag (p<0.05). Dosis ekstrak 4,20 mg/20 g berat badan efektif meningkatkan aktivitas fagositosis dan sekresi ROI, fagositosis meningkat 308% dan sekresi ROI 214%. Dosis paling efektif bagi mencit yang diinokulasi dengan L. monocytogenes 2,10 mg/20 g berat badan, fagositosis meningkat 348% sekresi ROI meningkat 395%. Ekstrak etanol daun mahkota dewa tidak berpengaruh terhadap aktivitas sintesis IL-12, tetapi dapat menginduksi aktivitas sintesis IL-12 pada mencit yang diinokulasi dengan L.monocytogenes. Makrofag pada mencit kelompok V yang mensintesis IL-12 mencapai 47%. Pengaruh terhadap sitotoksik sel NK1.1 paling efektif pada dosis 4,20 mg/20 g berat badan bagi mencit yang tidak diinokulasi dengan L.monocytogenes, sel target YAC-1 yang apoptosis 57%. Ekstrak etanol daun mahkota dewa pada dosis 2,10 mg/20g berat badan bagi mencit yang diinokulasi denga L. monocytogenes mempunyai pengaruh paling kuat, sel target yang apoptosis 78%. Sel NK1.1 yang mengekspresikan reseptor CD122 pada dosis 4,20 mg/20 g berat badan 75%, kemudian setelah mencit diinokulasi dengan L. monocytogenes meningkat menjadi 79% pada dosis 2,10 mg/20 g berat badan. Rerata persentase sel NK1.1 yang mengekspresikan reseptor NKG2D pada ketiga variasi dosis 86%, setelah mencit diinokulasi dengan L. monocytogenes dosis yang paling kuat efeknya 2,10 mg/20 g berat badan sehingga 94% sel NK1.1 mengekspresikan NKG2D. Dosis 4,20 mg/20 g berat badan paling efektif untuk aktivitas sintesis IFNγ, sel NK1.1 yang mengekspresikan IFNγ sitoplasmik mencapai 44%, kemudian setelah men- cit diinokulasi dengan bakteri L monocytogenes meningkat menjadi 76%. Kesimpulan: Ekstrak etanol daun mahkota dewa berpengaruh terhadap aktivitas fagositosis dan sekresi ROI makrofag, berpengaruh pada sel NK1.1 terhadap aktivitas sitotoksik, ekspresi reseptor NKG2D, CD122 dan sintesis IFNγ.

Background: A study has been conducted on leaves of mahkota dewa (Phaleria macrocarpa Scheff Boerl), a species of native Indonesian herb that based on empirical evidence is known to show medicinal properties. Obyective: To investigate the effect of mahkota dewa leaves etanol extract on activity of macrophages and natural killer (NK1.1) cells. experiments have been conducted in vitro. Macrophage activity includes phagocytosis, ROI secretion and IL-12 synthesis. Natural killer (NK1.1) cell activity comprises cytotoxicity, NKG2D, CD122 receptors expression and IFNγ synthesis. Methods: Balb/C strain mice were used to test macrophage activity while C57BL/6 strain mice were used to test NK1.1 activity. There were eight treatment groups consisting of five mice in each. Group I, II and III, were treated using 1,05, 2,10 and 4,20 mg/20 g of body weight of mahkota dewa leaves etanol extract. respectively, following the 30 days of treatment the mice were sacrificed. Group IV, V and VI were treated at the dose similar to that given to the first 3 groups. These group were then inoculated with 10 4 cfu. of L. monocytogenes. Following the 48 hours incubation the sample was then sacrifice. Group VII as untreated control group was given carboxyl methyl cellulosa Na 0,5%, then group VIII was inoculated with 10 4 cfu L. monocytogenes. Result: Mahkota dewa leaf etanol extract is able to enhance macrophage phagocytosis and ROI secretion. At the dose of 4,20 mg/20 g of body weight gives powerful effect on phagocytic activity by 308% and ROI secretion activity by 214%. Meanwhile, at dose of 2,10 mg/20g of body weight phagocytic activity increase 348% and ROI secretion 395% on the additionally L. monocytogenes infected mice. This extract do not affect macrophage IL-12 synthesis however, it can induce the IL-12 synthesis when mice are additionally infected by L. monocytogenes. The most effective effect is at the dose of 2,10 mg/20 g of mouse body weight with the IL-12 expression of 47%. The dose of 4,20mg/20g of body weight gives the most powerful effect on cytotoxic activity of NK1.1 cells, 59% of target cells YAC-1 undergos to apoptosis. Whereas, at the dose of 2,10, mg/20g of body weight shows the strongest cytotoxic activity against YAC-1 (78%) on the NK1.1 cell of the additionally L. monocytogenes infected mice. The most effective dose on intensifying the expression of CD122 receptor (75%) is 4,20mg/20g of body weight. Whereas, the most effective dose on additionally L. monocytogenes infected group is 2,10 mg/20g of body weight with the expression of CD122 receptor of 79%. Similarly, this extract has the ability to enhance the expression of NKG2D receptor about 86%. In the event of additionally L .monocytogenes infection, 2,10 mg/20 g is the most effective dose on improving the expression of NKG2D receptors at 94%. At the dose of. 4,20 mg/20 g of body weight, the extract has the strongest effect on IFNγ synthesis, about 44% NK1.1 express IFNγ cytoplasmic on the uninoculated mice and 76% on the additionally innoculated L. monocytogenes mice. Conclusion: Mahkota dewa leaf etanol extract is able to enhance macrophage activity on phagocytosis and ROI secretion. This extract affect on cytotoxic activity, expression of CD122, NKG2D receptors and on synthesing IFNγ of NK1.1 cells.

Kata Kunci : mahkota dewa makrofag fagositosis ROI IL-12 NK1.1 sitotoksik NKG2D CD122 IFNγ