PREPARASI NANOPARTIKEL KURKUMIN MENGGUNAKAN KITOSAN RANTAI SEDANG DAN UJI CELLULAR UPTAKE PADA KULTUR SEL T47D SECARA IN VITRO

Yos Banne. S.Si., Apt, Dr. rer.nat. Ronny Martien, M.Si.,

2011 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Kurkumin memiliki berbagai aktivitas biologis dengan spektrum luas, namun mempunyai kelarutan rendah dalam air sehingga menghasilkan bioavailabilitas sistemik minimal. Masalah ini dapat diatasi dengan sistem nanopartikel dengan suatu polimer sebagai pembawa sehingga dapat meningkatkan kelarutannya. Penelitian ini bertujuan untuk membuat nanopartikel kurkumin yang stabil, aman dan mampu masuk ke dalam sel dengan kitosan rantai sedang sebagai pembawa. Preparasi nanopartikel kurkumin-kitosan dibuat dengan metode ionik gelasi dalam dapar asetat pH 4 dan 5, kemudian dikarakterisasi meliputi pemeriksaan ukuran partikel dan potensial zeta, morfologi dan penetapan entrapment efficiency-nya. Stabilitas ditentukan dengan mengukur kurkumin bebas dalam artificial intestinal fluid (AIF) dengan spektrofotometer uv-vis (λ 419 nm). Toksisitas ditetapkan dengan metode MTT dengan kultur sel Vero sebagai sel model. Cellular uptake pada kultur sel T47D diamati menggunakan mikroskop fluoresens. Nanokurkumin yang dibuat mempunyai diameter rata-rata 563,77 nm dengan zeta potensial (+) 23 mV, bentuk sferik, entrapment efficiency antara 70,25-90,02 % dan stabil dalam AIF dengan stabilitas antara 83,61-85,36 %. Uji MTT menunjukkan bahwa nanokurkumin tidak toksik terhadap sel Vero dengan persentase viabilitas > 80 %, dan pengamatan dengan mikroskop fluoresens menunjukkan bahwa nanokurkumin mampu masuk ke dalam sel T47D. Berdasarkan hasil penelitian, preparasi nanopartikel kurkumin dengan pembawa kitosan rantai sedang bersifat aman, stabil dan mampu masuk ke dalam sel.

Curcumin has various of biological activities with broad spectrum, but it has low solubility in water resulting in low systemic bioavailability. This study aims to formulate curcumin nanoparticles with medium-chain chitosan as a carrier which is known to be stable, safe and able to enter the cells. Preparation of curcumin-chitosan nanoparticles prepared by ionic gelation method in an acetate buffer pH 4 and 5. Characterization was due to measure the particle size and zeta potential, morphology of nanoparticle and to determined its entrapment efficiency. The nanoparticle stability is determined by measuring the free curcumin released in artificial intestinal fluid (AIF). The toxicity determined by MTT method with Vero cells as the cell culture model. The cellular uptake on T47D cells was observed using a fluorescent microscope. The nanocurcumin prepared in acetate buffer pH 4 have an average diameter of 563.77 nm with a zeta potential (+) 23 mV, the entrapment efficiency is 70.25 to 90.02% and the stability in the AIF is 83,61 % to 85,36 %. MTT test showed that nanocurcumin is not toxic to the Vero cell with viability > 80 % , and observation by fluorescence microscopy showed that nanocurcumin is able to enter the cell. Based on the results, it is concluded that nanoparticle formulations of curcumin with medium-chain chitosan as a carrier is safe, stable and is able to enter the cell.

Kata Kunci : preparasi nanokurkumin, stabilitas, toksisitas, sel T47D, cellular uptake.