ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA IMUNOMODULATOR UMBI SARANG SEMUT (Myrmecodia pendens MERR & PERRY)

Maria Ulfah, S.Farm., Apt., Dr. rer. nat. Triana Hertiani, M.Si., Apt.

2011 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Imunomodulator adalah agen yang membantu dalam menjaga dan memelihara sistem kekebalan tubuh. Umbi Sarang semut termasuk famili Rubiaceae yang banyak digunakan oleh masyarakat Indonesia sebagai obat tradisional untuk berbagai penyakit. Efek terapi yang luas kemungkinan disebabkan oleh aktivitas imunomodulator. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas imunomodulator dan mengidentifikasi senyawa aktif dari umbi sarang semut (Myrmecodia pendens Merr & Perry) secara in vitro. Serbuk kering umbi sarang semut dimaserasi dengan etanol 95%. Ekstrak kental yang diperoleh dipartisi cair-cair bertahap menggunakan pelarut n-heksan, etil asetat dan air. Ekstrak dan fraksi diuji terhadap proliferasi limfosit dan fagositosis makrofag. Sel limfosit dan sel makrofag diisolasi dari mencit galur Balb/c jantan, usia 2 bulan. Fraksi yang paling aktif difraksinasi lebih lanjut dengan menggunakan dua metode yang berbeda, yaitu: kolom kromatografi (sephadex LH20 metanol) dan kolom kromatografi cair vacum (silica gel, gradien solven dengan polaritas yang meningkat.dimulai dari n-heksan kemudian etil asetat, diakhiri dengan metanol ). Fraksi-fraksi yang dihasilkan selanjutnya diuji aktivitas proliferasi limfositnya dengan MTT assay. Pada saat yang sama, setiap fraksi juga diuji kandungan senyawa fenolik dengan menggunakan metode Folin-Ciocalteau. Senyawa aktif diidentifikasi dengan Kromatografi lapis tipis, spektroskopi GC-MS, UV-Vis, IR dan 1H-NMR. Hasil penelitian menunjukkan bahwa senyawa fenolik berperanan pada aktivitas peningkatan proliferasi limfosit. Fraksi 7 yang dihasilkan dari kolom kromatografi cair vacum (etil asetat-metanol, 7:3 v/v) mengandung senyawa aktif yang dapat meningkatkan proliferasi sel limfosit. Hasil GC-MS menunjukkan bahwa senyawa fenolik dengan kemurnian 79%. Spektrum UV-Vis, IR dan 1H-NMR menunjukkan bahwa isolat kemungkinan adalah suatu glikosida fenolik. Pemurnian dan hidrolisis lebih lanjut diperlukan untuk memperoleh senyawa murni sehingga lebih mudah diidentifikasi.

Immunomodulator is an agent that helps to maintain immune system. Ants plant belongs to rubiaceae family that is widely used by Indonesian people as part of traditional medicine for various diseases. Wide therapeutic effects suggest its immunomodulatory activity as part of healing properties. The purpose of this study was to investigate the immunomodulatory activity and to identify the active compound of the ants plant (Myrmecodia pendens Merr & Perry) by an in vitro technique. Dried powders of ant plant were extracted by using maceration method with ethanol 95%. Extract obtained was then fractioned by liquid-liquid partition using n-hexane, ethyl acetate and water, excessively. Extracts and fractions were tested against lymphocyte proliferation and macrophage phagocytosis. Lymphocytes and macrophages were isolated from Balb/c male mice 2 months old. The most active fraction was further fractionated by using two different method, i.e: column chromatography (sephadex LH20, metanol) and VLC (silica gel, increasing polarity of solvent started from n-hexane followed by ethyl acetate and ended by methanol). The fractions yielded were further tested by lymphocyte proliferation assay using MTT assay. Each fractions was analysed the total phenolic contents by using Folin-Ciocalteau method. Active compound was identified by GC-MS, UV-Vis spectroscopy, IR and 1H-NMR. The study result showed that phenolic compounds played a role in lymphocyte proliferation induction. Fraction 7 yielded from VLC (ethyl acetatemethanol; 7:3 v/v) was ane of active compound that could induce lymphocyte proliferation. GC-MS indicated that a phenolic compound with 79% purity. Uv- Vis spectroscopy, IR and 1H-NMR spectra showed that the isolate is a phenolic glycoside. Further purification and hydrolisis are needed in order to obtain pure compound that is easier to be identified.

Kata Kunci : Isolasi, Myrmecodia pendens Merr & Perry, Imunomodulator, MTT assay dan Identifikasi Struktur.