ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA PENANGKAP RADIKAL BEBAS DARI DAUNWORTEL (Daucus carota L.)

SRI SUDEWI, Dr. Puji Astuti, M.Sc., Apt.

2011 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Daun wortel merupakan material terbuang dari tanaman wortel yang hanya dimanfaatkan oleh petani wortel sebagai pakan ternak dan kompos.Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi serta mengetahui potensi senyawa yang mempunyai aktivitas antioksidan penangkap radikal bebas dari daun D. carota. Serbuk kering daun D. carota (100,19 g) dimaserasi secara bertingkat untuk memisahkan senyawa non polar dan polar mulai dengan washbenzen, etil asetat dan terakhir dengan metanol. Ketiga ekstrak kental diuji aktivitas penangkap radikal bebas dengan disemprot DPPH 0,2%. Ekstrak yang menunjukkan aktivitas penangkap radikal bebas kemudian dipartisi dan difraksinasi menggunakan kromatografi vakum cair dengan fase gerak yang yang menaik kepolarannya yakni nheksana, kombinasi n-heksana dan etilasetat serta metanol. Masing-masing fraksi yang diperoleh diuji aktivitas penangkap radikal bebasnya dan dilihat profil KLTnya. Senyawa aktif pada fraksi aktif diisolasi dengan menggunakan kromatografi lapis tipis preparatif. Senyawa aktif (isolat) yang diperoleh diuji kemurniannya secara KLT dengan tiga macam sistem fase gerak dan KLT 2 dimensi. Identifikasi struktur senyawa aktif dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis, IR, dan 1 H- NMR dan menentukan aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode penghambatan logam. Senyawa penangkap radikal bebas diduga sebagai turunan xantofil yang mengarah ke senyawa lutein. Dugaan ini berdasarkan atas data spektrofotometer UV- Vis, IR dan 1H-NMR yang sebanding dengan data lutein dari literature. Isolat mampu menghambat kelat sebesar 0,94 + 0,05; 18,53 + 0,15; dan 49,07 + 0,86 % pada konsentrasi 0,616; 1,025; dan 2,05 ppm. Data literatur menunjukkan EDTA (kontrol positif) memberikan penghambatan kelat dengan nilai IC50 sebesar 18,19 ppm

Carrot leaves is awaste material from carrot which only used by the farmer as fertilizer and animal feed.This research was conducted to isolate and identified and to know the potention of compound which have the free radical scavenger antioxidant activity from the leaves of D.carota. Dried powder of D. carota leaves (100,19 g) was maserated to separate non polar and polar compounds from washbenzene, ethyl acetate, and finally with methanol. Those three crude extract was examined to free radical scavenging activity and sprayed by DPPH 0,2%. The extract which shown free radical scavenging activity was partitioned and fractionated using vacuum liquid chromatography with gradient elution of its polarity, that is n-heksana, the combination of n-hexane and ethyl acetate as well methanol. Each fraction which obtained from the activities free radical scavenger examined was seen its TLC profile. The active compound on active fraction was isolated which using preparative thin layer chromatography. The active compound (isolate) obtained was examined for its purity by TLC with three systems of mobile phase and 2 dimention of TLC. The structure identification of active compound was conducted by using spectrophotometer UV-Vis, IR, and 1 H-NMR and determine antioxidant activity using chelating agent method. The suggested free radical scavenger compound is the derivatives of xanthophylls which was similar with lutein. This suggestion based on the data of spectrophotometer UV-Vis, IR,and 1H-NMR which were similar with the data of lutein from literature. The isolate could inhibit of chelat about 0.94 + 0.05; 18.53 + 0.15; and 49.07 + 0.86 % of 0,616; 1,025; dan 2,05 ppm. The reported literature of EDTA (positive control) has chelat inhibition with the IC50 value was 18,19 ppm.

Kata Kunci : Daun, D. carota L., penangkap radikal bebas.