EKSPRESI SIKLOOKSIGENASE-2 (COX-2) DI SEL GRANULOSA FOLIKEL OVARIUM AKIBAT PEMBERIAN KURKUMIN DENGAN DAN TANPA PENAMBAHAN TEOFILIN SETELAH STIMULASI LH (Kajian in vivo untuk menentukan letak kerja kurkumin pada rattus norvegicus strain sprague dawley dalam jalur transduksi signal ekspresi COX-2 pada jalur cAMP)

Dewi Puspita, Prof. dr. Sri Kadarsih Soejono., M.Sc., Ph.D.

2011 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Dasar dan Biomedis

Proses ovulasi melibatkan suatu urutan yang komplek dari kejadian biologis yang pada akhirnya menyebabkan ruptur folikel pre ovulasi. Pengikatan LH pada reseptornya di ovarium akan mengaktivasi cAMP secara langsung melalui jalur Protein Kinase A (PKA) dapat mengupregulasi ekspresi COX-2 pada sel granulosa pre ovulasi. Kurkumin dilaporkan sebagai inhibitor COX-2 yang menghambat biosintesis prostaglandin. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menilai penghambatan kurkumin melalui ekspresi COX- 2 di sel granulosa folikel ovarium tikus dan untuk menentukan letak kerja kurkumin berada di sebelum cAMP pada jalur transduksi sinyal ekspresi COX-2 pada jalur cAMP di sel granulosa folikel ovarium tikus. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah 27 ekor tikus strain sprague dawley umur 28 hari diinduksi dengan PMSG dengan dosis 5 IU untuk menyeragamkan fase estrus. Perlakuan diberikan pada umur 29 hari dengan memberikan LH 5 IU, Teofilin 25 mg/kgBB dan Kurkumin 100 mg/kgBB sesuai dengan kelompoknya. Hewan coba dikorbankan pada umur 30 hari dan dibuat preparat untuk dilihat ekspresi COX-2 pada sel granulosa folikel ovarium dengan metode immunohistokimia. Hasil dari penelitian ini menyatakan bahwa ekspresi COX-2 pada kelompok Kurkumin lebih rendah dan berbeda secara bermakna dibanding kelompok Kontrol. Ekspresi COX-2 pada kelompok LH+Teofilin+Kurkumin lebih rendah dan berbeda secara bermakna dibanding kelompok LH+Teofilin. Kesimpulan dari hasil penelitian ini bahwa kurkumin menghambat ekspresi COX-2 di sel granulosa folikel ovarium tikus dan letak kerja penghambatan kurkumin berada di sebelum cAMP dalam jalur transduksi sinyal ekspresi COX-2 melalui jalur cAMP pada sel granulosa folikel ovarium tikus

The pre-ovulatory surge of gonadotropins triggers a marked and obligatory increase in follicular prostaglandin syntesis prior to ovulation, and the cyclooxygenase-2 (COX-2) enzyme is a key enzyme that important in biosynthesis of prostaglandin. LH direct activates the cyclic adenosine monophosphat dependent protein kinase (PKA) pathway, were equally able to up regulate COX- 2 expression in pre ovulatory granulosa cells. Curcumin is a natural polyphenol with various beneficial biological activities and was shown to be a potent inhibitor of COX-2. The objective of this study is to asses the inhibition of curcumin on COX-2 expression in granulosa cells of the ovarian follicle and to know the action site of curcumin on signal transduction in cAMP pathway. The subject of this study were 27 female rattus norvegicus strain sprague dawley. At the age of 28 the subject were induced by 5 IU PMSG (Pregnant Mare Serum Gonadotropin). Rats were stimulated by 5 IU LH (Luteinizing Hormone),then administered by teophylline 25 mg/kgBW orally and curcumin 100mg/kgBW orally at 24 hours after PMSG administration. Aquades was administered as a control group. Rats were sacrified at 30 days of age. Evaluation of COX-2 expression and immunohistology samples of granulosa cells of ovary used immunohistochemistry technique with prime Antibody of Rabbit Monoclonal (RB-9072-P) to determine the antigen location. The result showed that COX-2 expression in curcumin group significantly decrease than in control group and COX-2 expression in LH+theophylline+curcumin groups significantly decrease than in LH+theophylline groups. The conclusion of this study suggest curcumin inhibited COX-2 in granulosa cells ovary follicle and the action site of curcumin inhibition is in the upstream of cAMP in protein kinase (PKA) pathway.

Kata Kunci : COX-2, Kurkumin, jalur Protein Kinase A (PKA).