DETEKSI INFEKSI VIRUS DENGUE-3 PADA NYAMUK Aedes aegypti DENGAN TEKNIK IMUNOSITOKIMIA MENGGUNAKAN ANTIBODI MONOKLONAL DSSE10

DYAH WIDIASTUTI, S.SI., Dr. drh. Sitti Rahmah Umniyati, SU.

2011 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Tropis

Latar Belakang: Virus Dengue, arbovirus yang paling banyak tersebar di seluruh dunia, ditularkan oleh nyamuk dari genus Aedes. Vektor terpenting dari virus Dengue adalah Ae.aegypti yang semestinya menjadi target utama dalam kegiatan survey dan pengendalian vektor. Pengamatan virus Dengue pada spesies vektor telah digunakan sebagai Sistem Kewaspadaan Dini (SKD) untuk memprediksi timbulnya Kejadian Luar Biasa (KLB) Demam Berdarah Dengue (DBD). Deteksi antigen virus Dengue pada sediaan head squash nyamuk dengan teknik imunositokimia streptavidin biotin peroxidase complex (SBPC) merupakan salah satu alternatif metode untuk surveilan vektor Dengue. Penelitian ini bertujuan untuk mengukur sensitivitas, spesifisitas, dan derajat kesepakatan antar pemeriksa (nilai kappa) dari uji imunositokimia SBPC untuk mendeteksi infeksi virus Dengue pada head squash nyamuk Ae.aegypti. Metode: Desain penelitian ini adalah experimental. Pada penelitian ini digunakan nyamuk Ae. aegypti yang diinfeksi intratorakal dengan virus Dengue-3 sebagai kelompok infeksius, dan nyamuk Ae.aegypti koloni laboratorium yang tidak diinfeksi virus Dengue-3 sebagai kelompok normal. Deteksi antigen virus Dengue-3 dilakukan dengan uji imunositokimia SBPC menggunakan antibodi monoklonal DSSE10pada sediaan head squash nyamuk Ae.aegypti. uji RT-PCR sebagai baku emas digunakan untuk mendeteksi RNA virus Dengue pada thorax nyamuk Ae.aegypti. Analisa hasil dilakukan secara deskriptif menggunakan tabel 2x2. Hasil: Uji imunositokimia SBPC mampu mendetekasi antigen virus Dengue pada hari ke-2 setelah nyamuk diinfeksi, sedangkan RT-PCR mampu mendeteksi pada hari ke-5. Pada uji imunositokimia, ditemukan beberapa hasil positif palsu. Sensitivitas uji imunositokimia adalah sebesar 100%, sedangkan spesifisitasnya adalah sebesar 91%. Nilai kappa menunjukkan derajat kesepakatan yang baik antara 2 orang pemeriksa (nilai kappa 0,63). Kesimpulan: Uji Imunositokimia pada sediaan head squash nyamuk Ae. Aegypti memiliki nilai sensitivitas dan spesifisitas yang tinggi serta nilaki kesepakatan kappa yang baik..

Background: Dengue viruses, globally the most prevalent arboviruses, are transmitted to humans by persistently infected Aedes mosquitoes. The most important vector of Dengue virus is the mosquito Ae.aegypti, which should be the main target of surveillance and control activities. Virologic surveillance for dengue viruses in its vector has been used as an early warning system to predict outbreaks. Detection of Dengue virus antigen in mosquito head squash using immunocytochemical streptavidin biotin peroxidase complex (SBPC) assay is an alternative method for dengue vector surveillance. The study aimed to measure sensitivity, specificity and interobserver agreement (kappa value) of immunocytochemical SBPC assay to detect Dengue virus infection in head squash of Ae.aegypti. Methods: The study design was experimental. Artificially-infected adult Ae. aegypti mosquitoes of DENV 3 were used as infectious samples and noninfected adult Ae. aegypti mosquitoes were used as normal ones. The immunocytochemical SBPC assay using monoclonal antibody DSSE10 then was applied in mosquito head squash to detect Dengue virus antigen. RT-PCR as a gold standard was applied in mosquito thorax. The results were analyzed by descriptive statistic test and 2x2 diagnostic test table. Results: The immunocytochemical SBPC assay can detect Dengue virus antigen in mosquito head squash at day 2 postinfection, while RT-PCR can detect at day 5 postifection. There are some false positive results found in immunocytochemical SBPC assay. The sensitivity of immunocytochemical SBPC assay in mosquito head squash was 100% with a specificity of 91%. Whilst the kappa value showed a good agreement between two observers (kappa value 0,63). Conclusions: The immunocytochemical SBPC assay in mosquito head squash has high sensitivity, high specificity and good interobserver agreement.

Kata Kunci : Dengue, imunositokimia SBPC, DSSE10, head squash, Aedes aegypti.